Алехин В.Г., Фахрутдинов А.И., Малышкина Л.А., Ситников А.В, Емцев В.Т., Хотянович А.В.
Современный микробиологический метод рекультивации, основанный на применении высокоэффективных штаммов нефтеокисляющих микроорганизмов, выделенных из загрязненных природных объектов, широко применяется в мировой практике рекультивационных мероприятий [I].
Важнейшим фактором, разносторонне влияющим на активность процесса разрушения углеводородов в почве нефтеокис-ляющими микроорганизмами, являются почвенно-климатические условия [2]. Эффективная деструкция различных углеводородов микроорганизмами, внесенными в почву с препаратом, возможна лишь в тех случаях, когда они найдут в почве (или других средах, куда будут помещены) благоприятные условия для жизнедеятельности и развития (источники питания, необходимый тепловой и водный режимы, и т.д.), т.е. микроорганизму (или группе микроорганизмов) необходимо создать благоприятную экологическую нишу, в которой он будет развиваться [3,4, 5].
Очень большое значение для жизнедеятельности нефтеокисляющих микроорганизмов имеет и качественный состав нефтяного сырья, попавшего в почву (или другую среду), и время, прошедшее с момента загрязнения. Различные фракции нефтепродуктов, их сочетания по-разному влияют на микроорганизмы, в том числе внесенные с биопрепаратами [1, б]. Это вызвано возможностью использования различных углеводородов как источника энергии у данных микроорганизмов и определяется их фи-зиолого-биохимическими особенностями, способностью разрушать тяжелые или легкие фракции углеводородного сырья [5, 7].
Отсюда следует, что применение каждого биопрепарата, имеющего в своем составе активные формы микроорганизмов, требует создания оригинальной технологии и строгого ее выполнения в процессе использования препарата. Для каждой почвен-но-климатической зоны технология должна корректироваться. Главными факторами, накладывающими особенности на технологию в условиях Среднего Приобья, являются короткий период активных температур и химической состав разлитой нефти [2]. При этом вполне возможно, что штаммы микроорганизмов, выделенные в зонах умеренного климата и активно разрушающие там углеводороды, в условиях Севера "работать" не будут в силу своих физиологических особенностей, адаптированных к более мягким климатическим условиям [8].
Цель проведенных исследований - оценка эффективности различных биопрепаратов при деструкции нефтяных углеводородов в образцах торфогрунта, выполненная в лабораторных условиях.
Методика проведения эксперимента
В качестве объекта исследований был использован загрязненный нефтью торфогрунт, отобранный с места аварийного разлива нефти семилетней давности на Западно-Сургугском месторождении (куст 84). Образцы торфа обрабатывали следующими препаратами: деворойл 1 (порошок), деворойл 2 (порошок), деворойл (паста), инипол, фаерзайм, биоприн, деградойлас 81, деградойлас Nj9, ремедиаст, биопрепарат 999, биопрепарат 670, нафтокс (жидкий), нафтокс, псевдомин.
Опыт проводился на базе Инженерно-экономического внедренческого центра ОАО "Сургутнефтегаз" и был организован Отделом охраны природы и борьбы с коррозией.
Для испытания каждого из препаратов использовали 2 сосуда по 10 кг нефтезагрязненного торфогрунта в каждом, а также 2 сосуда с контрольными образцами. Опыт был поставлен на 2-х уровнях нефтяного загрязнения - среднем (170-250 г/кг) и очень высоком (300-600 г/кг). Обработка каждого образца нефтезагрязненного торфяника проводилась в соответствии с рекомендованной разработчиком технологией. Сосуды с образцами в течение опыта находились при температуре 18-20 °С.
По ходу эксперимента раз в неделю проводилось увлажнение путем дождевания и рыхления торфяника, а также внесение минеральных удобрений (для тех препаратов, где это предусмотрено технологией, предложенной разработчиком препарата).
Содержание нефтепродуктов в торфе определяли методом ИК-спектрометрии на приборе АН-1 (анализатор нефтепродуктов) в соответствии с РД 390147098-015-90 "Инструкции по контролю за состоянием почв на объектах предприятий Миннефтегазпро-ма"; использовали ГОСТ-Р, разработанный ВНИГРИ "Определение содержания нефтепродуктов в почвах и грунтах".
Эффективность воздействия биопрепаратов рассчитывалась по отношению разрушенных (усвоенных) микроорганизмами нефте-углеводородов к исходному их содержанию в образцах за время t, выраженному в процентах:
Эфф=((С0 - Сt)/C0) x100,
где: Со - исходное содержание нефтепродуктов в торфогрунге;
С t - содержание нефтепродуктов в еженедельных отборах образцов торфогрунта
Для оценки влияния биопрепаратов на биологическую активность почвы на последнем этапе испытаний отбирались образцы торфа для микробиологических исследований.
Изучение общей биологической активности почв вели на твердой питательной среде МПА, а численность нефтеокисляющих микроорганизмов определяли на твердой среде Придхема - Готглиба [9], в которую добавлялась нефть как единственный источник энергии в количестве 1, 2, 3, 4, 5%. Подсчет микроорганизмов вели чашечным методом [10].
Результаты исследований и их обсуждение
Рассмотрение полученных экспериментальных данных проводилось по 2 критериям оценки способности биопрепаратов к деструкции углеводородов нефти:
критерий 1 - по времени, в течение которого достигается 50% эффективность, т.е. по скорости расщепления углеводородов нефти;
критерий 2 - по максимальному снижению содержания углеводородов нефти в образцах торфа за 11 недель.
В таблице 1 представлены результаты анализов остаточного содержания нефтепродуктов в образцах торфа, которые показывают, что через 2 недели при одностадийной обработке почвы в сосудах 50%-го уровня эффективности снижения нефтепродуктов в торфе достигли: деворойл - 61,49%, инипол - 58,94%, фер-займ - 58,32%, ремедиаст - 65,32%. № 999 - 67,37%, № 670 - 63,36.
Эффективность действия псевдомина и нафтокса для сосудов с "низким" уровнем загрязнения (порядка 200 г/кг) превысила 50% уровень после 5-ти недель с момента обработки (табл. 2). Следует особо подчеркнуть способность нафтокса к интенсивному разложению нефтепродуктов на "высоком" уровне загрязнения (584 г/кг). Пятидесятипроцентный барьер здесь был преодолен через 2 недели после обработки, значение эффективности составило 60,1%. Кроме того, произошло разрыхление обработанного торфа, он приобрел способность поглощать и удерживать воду. Остальные испытуемые препараты достигли 50% уровня эффективности по истечении 4-х недель с проведением дополнительной обработки.
Таблица 1
Содержание нефтеуглеродов в образцах торфа (г/кг) и эффективность их разрушения биопрепаратами
| Препарат | Исходноесодержание | Через 2 недели | Через 7 недели | Через 11 недели | |||
| Содержание | эфф., % | Содержание | эфф., % | Содержание | эфф., % | ||
| Деворойл 1 | 264 | 138,9 | 36,5 | 99 | 56,7 | 76 | 64,9 |
| 290 | 215,5 | 141 | 120 | ||||
| Деворойл 2 | 289 | 108,6 | 61,5 | 84.5 | 69.6 | 75,5 | 72,5 |
| 270 | 106,5 | 85.5 | 77.0 | ||||
| Леворойл паста | 269 | 149,5 | 40,5 | 117,0 | 56 | 89 | 64,8 |
| 302 | 191,5 | 134,0 | 112,5 | ||||
| Биоприн | 305 | 228,5 | 31,2 | 130 | 55,8 | 111,7 | 62,3 |
| 293 | 182,5 | 134,5 | 118,8 | ||||
| Инипол | 371 | 175 | 58,9 | 128 | 69,8 | 97 | 78,5 |
| 363 | 126,9 | 94 | 61 | ||||
| Фаерзайм | 285 | 129 | 58,3 | 94 | 68,6 | 760 | 74,7 |
| 273 | 103.8 | 81 | 650 | ||||
| Деградойлас 81 | 254 | 167,7 | 39,9 | 115,5 | 57,3 | * | 57,3 |
| 365 | 197,1 | 149 | * | ||||
| Деградойлас Nj9 | 304 | 199,5 | 29,7 | 93.5 | 66,6 | * | 66,6 |
| 258 | 193,5 | 94.0 | * | ||||
| Ремедиаст | 278 | 96 | 65,3 | 70,5 | 74,5 | * | 74,5 |
| 288 | 100,5 | 74 | * | ||||
| Препарат №670 | 319 | 137 | 63,3 | 88,5 | 76,1 | * | 76,1 |
| 468 | 142 | 99,5 | * | ||||
| Препарат №999 | 340 | 126,9 | 67,4 | 89,5 | 75,6 | * | 75,6 |
| 330 | 92,4 | 74 | * | ||||
| Контроль | 261 | 244,5 | 224,5 | ||||
| 264 | 205 | 188,5 | |||||
| Примечание: * - испытание препаратов прекращено из-за полученной высокой эффективности | |||||||
Таблица 2
Содержание нефтеуглеродов в образцах торфа (г/кг) и эффективность их разрушения биопрепаратами псевдомин, нафтокс, нафтокс жидкий
| Препарат | Исходноесодержание | Через 1 недели | Через 2 недели | Через 3 недели | |||
| Содержание | эфф., % | Содержание | эфф., % | Содержание | эфф., % | ||
| Псевдоним | 197 | 175 | 11,2 | 144 | 27 | 115 | 41.6 |
| 552 | 459 | 16,8 | 412 | 25,4 | 398 | 37161 | |
| Нафтокс | 203 | 138 | 32,2 | 119 | 41.4 | 114 | 44,1 |
| 584 | 511 | 12,5 | 233 | 60,1 | 227 | 61,1 | |
| Нафтокс жидкий | 203 | неопр. | не опр. | 199 | 2.0 | 153 | 24,6 |
| 532 | 476 | 10,5 | 449 | 15,9 | 419 | 21,2 | |
| Препарат | Через 4 недели | Через 8 недели | Через 11 недели | |||
| Содержание | эфф., % | Содержание | эфф., % | Содержание | эфф., % | |
| Псевдомин | 114 | 42.4 | 58 | 70,8 | 48 | 75,6 |
| 381 | 31 | 332 | 40 | 314 | 43,1 | |
| Нафтокс | 109 | 46.3 | 82 | 60 | 54 | 73,4 |
| 209 | 64,2 | 173 | 70,4 | 161 | 72,4 | |
| Нафтокс жидкий | 118 | 41,8 | 83 | 59,4 | 59 | 70,9 |
| 380 | 28.4 | 329 | 38,2 | 294 | 44,7 | |
| Примечание: Внесение минеральных удобрений, мела и оструктуривателя произведено через 7 недель от начала опыта | ||||||
Таблица 3