Фотометричне визначення вуглеводів в горілках (стр. 8 из 10)

Рис. 2.6.14 Градуювальний графік з рафінози з антроновим реагентом

Таблиця 2.6.15 Дані визначення рафінози з пікриновою кислотою (інверсія)

Аліквота стандартного р-ну в колбу на 50 мл, мл	Концентрація робочого р-ну, мг/см³	Конентрація градуювального р-ну, мг/см³	Аліквота Градуювального р-ну, см³	Кількість цукру в реакційній суміші, мг	Оптична густина	Середня оптична густина
							0	0.0	0.000	2.5	0	0.000	0
							5	0.1	0.100	2.5	0.25	0.001	0.001
												0.000
10	0.2	0.200	2.5	0.5	0.025	0.027
					0.029
20	0.4	0.400	2.5	1	0.286	0.284
					0.281
25	0.5	0.500	2.5	1.25	0.417	0.414
					0.411
50	1.0	1.000	2.5	2.5	1.076	1.074
					1.071

Рис. 2.6.15 Градуювальний графік вмісту рафінози з пікриновою кислотою

Таблиця 2.6.16 Дані визначення алкософту з антроновим реагентом.

Концентрація, мг/см³	Аліквота, см³	Розведення	Оптична густина	Середня оптична густина	Кількість цукру в реакційній суміші, мг
0.0	2.5	50	0.000	0	0
0.2000	2.5	50	0.015	0.013	0.01
0.2000			0.011
0.5000	2.5	50	0.028	0.031	0.025
0.5000			0.033
0.7500	2.5	50	0.050	0.052	0.0375
0.7500			0.053
1.0000	2.5	50	0.077	0.079	0.05
1.0000			0.080
1.5000	2.5	50	0.130	0.126	0.075
1.5000			0.121
2.0000	2.5	50	0.160	0.159	0.1
2.0000			0.158
2.5000	2.5	50	0.196	0.198	0.125
2.5000			0.200
5.0000	2.5	50	0.419	0.420	0.25
5.0000			0.421

Рис. 2.6.16 Градуювальний графік вмісту алкософту з антроновим реагентом

Таблиця 2.6.17 Дані визначення алкософту з пікриновою кислотою (інверсія)

Аліквота стандартного р-ну в колбу на 50 мл, мл	Концентрація робочого р-ну, мг/см³	Конентрація градуювального р-ну, мг/см³	Аліквота Градуювального р-ну, см³	Кількість цукру в реакційній суміші, мг	Оптична густина	Середня оптична густина
							0	0,0	0,000	2,5	0	0,000	0
							5	0,1	0,100	2,5	0,25	0,000	0,000
												0,000
10	0,2	0,200	2,5	0,5	0,001	0,001
					0,000
20	0,4	0,400	2,5	1	0,142	0,140
					0,137
25	0,5	0,500	2,5	1,25	0,213	0,210
					0,207
50	1,0	1,000	2,5	2,5	0,563	0,561
					0,558

Рис. 2.6.17 Градуювальний графік вмісту алкософту з пікриновою кислотою

З наведених даних видно, що чутливість визначення вуглеводів з антроновим реагентом в 30-50 разів вища, ніж чутливість визначення відповідних вуглеводів з пікриновою кислотою.

Усі результати пунтку 2.6 звели в таблицю 2.7.1.

2.7 Порівняння результатів визначення цукрів двома фотометричними методами

З таблиці 2.7.1 видно, що межа визначення вуглеводів при використанні антронового реагенту приблизно в 30 разів нижча ніж при використанні пікринової кислоти.

Фотометричний метод заснований на реакції з антроновим реагентом є більш чутливий для усіх індивідуальних вуглеводів, цей метод більш безпечний в порівнянні з пікриновою кислотою, адже як відомо пікринова кислота (тринітрофенол) вибухонебезпечна та більш канцерогенна, хоча ці два методи займають однакову кількість часу.

Таблиця 2.7.1 Порівняння антронового реагенту та пікринової кислоти

Цукри	Метод
	Рівняння градуювальних графіків					Графік лінійний за концентрацією градуювального розчину, мг/см³
	Рівняння градуювальних графіків							Антрон		Пікринова к-та
	Розве-дення	Графіки	Розве-дення	Графіки				Антрон	Пікринова к-та
	Глюкоза	50	y=2.9307x+0.0065	1	Без інверсії	y=0.5232x-0.1334	0.004 - 0.1	0.1 - 1
Арабіноза	5	y=0.4882x-0.0233	2	y=0.6905x-0.0827		0.04 - 1	0.05 - 1
Фруктоза	50	y=3,9766x+0,0068	1	y=0.4492-0.1173		0.004 - 0.25	0.1 - 1
Галактозa	50	y=2.1438x-0,0034	1	y=0.4582x-0.1308		0.004 - 0.1	0.11 - 1
Сахароза	50	y=3.5852x+0.0137	1	З інверсією	y=3,5852x-0.0137	0.004 - 0.1	0.1 - 1
Рафіноза	50	y=3.1316x-0.0110	1		y=0.5241x-0.2384	0.004 - 0.1	0.18 - 1
Мальтоза	25	y=3.3682x+0.0115	1		y=0.5402x-0.2412	0.008 - 0.19	0.18 - 1
Алкософт	50	y=1.6914x-0.0068	1		y=0.2802x-0.1401	0.004 - 0.1	0.2 - 1
Лактоза	25	y=2.776x+0.0136	1		y=0.5299x-0.2038	0.008 - 0.2	0.15 - 1

2.8 Оцінка збіжності, відтворюваності та правильності результатів

Правильність розроблених методик перевірили методом введено-знайдено для двох вуглеводів (глюкоза та сахароза). Знаходили вміст цукру за градуювальними графіками, які будували в день аналізу для обох фотометричних методів.

Таблиця 2.8.1 Дані визначення вмісту сахарози з антроновим реагентом

Концентрація, мг/см³	Аліквота, см³	Розведення	Оптична густина	Середня оптична густина	Кількість цукру в реакційній суміші, мг
0,2	2,5	50	0.050	0.051	0.01
0,2			0.052
0,5	2,5	50	0.107	0.107	0.025
0,5			0.107
0,75	2,5	50	0.151	0.152	0.0375
0,75			0.152
1,0	2,5	50	0.190	0.191	0.05
1,0			0.191
1,5	2,5	50	0.280	0.279	0.075
1,5			0.278
2,0	2,5	50	0.383	0.381	0.1
2,0			0.379
2,5	2,5	50	0.491	0.492	0.125
2,5			0.493
5,0	2,5	50	0.960	0.961	0.25
5,0			0.961

Рис. 2.8.1 Градуювальний графік вмісту сахарози з антроном

Градуювальні графіки будували, як вказано в пункті 2.6.

Далі надені результати вимірів для метрологічної характеристики методу.

Таблиця 2.8.2 Метод „введено–знайдено”для сахарози з антроновим реагентом.

№ опиту	Введено концентрація, мг/см³	Аліквота, см³	Розведення	Оптична густина	Знайдено за градуювальним графіком концентрація, мг/см³
						1	2.0	2.5	50	0.387	2.00
												2	2.0	2.5	50	0.386	1.99
						3	2.0	2.5	50	0.389	2.01
4	2.0	2.5	50	0.388	2.00
						5	2.0	2.5	50	0.390	2.01
Середнє	2.0			2.00±0,01

Потім будували градуювальний графік для глюкози з антроновим реагентом.