Основные признаки дрожжей. Дрожжи представляют собой одноклеточные неподвижные микроорганизмы с наличием дифференцированного ядра, с размерами в поперечнике 3-5 мкм, по длине и 6-12 мкм. Форма клеток дрожжей чаще округлая, яйцевидная (Saccharomyces). цилиндрическая (Schisosaccharomyces), лимоновидная (Saccharomycodes).
В цитоплазме дрожжевой клетки можно увидеть различного рода включения - капель жира, гликоген, валютин. По мере старения клетки в ней появляются вакуоли-полости, наполненные клеточным соком. Размножаются дрожжи преимущественно путем почкования, многие способны еще и к спорообразованию.
Задание I. Приготовить препарат типа "раздавленная капля"
Техника приготовления препарата «раздавленная капля». На середину чистого предметного отекла наносят небольшую капли воды. бульона или физиологического раствора (0,5%-ный раствор NaCI). В нее петлей или иглой вносят небольшое количество исследуемого материала, после чего хорошо размазывают до получения слабомутной суспензии. При рассматривании микроорганизмов, выросших на жидких средах, капли воды на предметное стекло можно не наносить. Покровное стекло ставим на ребро у края капли с микроорганизмами и постепенно опускаем, стараясь, чтобы между стёклами не образовывались пузырьки воздуха, мешающие микроскопированию. Стеклянным концом петли прижимают покровное стекло к предметному. Излишек выступившей жидкости убирают полоской фильтровальной бумаги. Приготовленный препарат сразу же исследуют - сначала с небольшим увеличением (объектив 8х), отыскивая участок с наиболее четким расположением микроорганизмов, а затем рассматривают его с объективом 40х. Порядок выполнения работы. Для приготовления препарата «раздавленная капля» стерильной зубочисткой или спичкой без серы) снять налет со своих зубов, лучше между деснами и зубами, внести его в каплю воды и приготовить из этого материала препарат типа "раздавленная капля.". Препарат рассмотреть-с объективом 40х. Зарисовать все встречающиеся формы бактерий.
Задание 2. Приготовить в живом виде препарат дрожжей
Порядок проведения работы. Приготовить два-три препарата "раздавленная капля" различного вида чистых культур дрожжей, "зарисовать и описать эти препараты. Найти в них зарисовать почкующиеся метки.
Вопросы для самопроверки
1 Напишите порядок приготовления препарата "раздавленная капля".
2 Какую форму имеют дрожжевые клетки?
3 По каким признакам можно отличить бактериальную клетку от дрожжевой?
4 Каким вегетативным способом размножаются дрожжи, зарисуйте последовательность размножения.
Лабораторная работа №4
Изучение морфологических признаков мицелиальных грибов
Оборудование и материалы. Предметные и покровные стекла, препаровальные иглы, ванночка с мостиком, промывалка, микроскоп, чистые культуры мицелиальных грибов, смесь равных объемов этилового спирта и глицерина.
Основные признаки мицелиальных грибов, мицелиальные грибы -это обширная группа низших растительных организмов, лишенных хлорофилла. Тело мицелиального гриба, грибница или мицелий, состоит из множества переплетающихся нитей - гифов, которые густой сетью сплетаются на поверхности питательного субстрата. От ветвистого -, мицелия отходят плодоносящие гифы - спорангии и конидиеносцы, на концах которых находятся плодовые тела.
Техника приготовления препаратов. При исследовании грибов из их культур берется небольшой кусочек мицелия с помощью двух препаровальных игл. Мицелий на предметном стекле осторожно расщепляют иглами, стремясь как можно лучше разъединить гифы. В качестве жидкости используют смесь спирта и глицерина.
Задание I. Изучите морфологические признаки гриба Mucor
Порядок проведения работа. Для приготовления препарата возьмите, двумя препаровальнымя иглами черновато-серый пушистый воздушный мицелий гриба Mucor и осторожно внесите его в каплю смеси спирта и глицерина на предметном стекле, наложите покровное стекло, не придавливая его, чтобы не раздавить спорангий. При микроскопировании выявите одноклеточное строение мицелия и органы размножения - спорангиеносцы. Рассмотрите их по всей длине, передвигая препарат. Спорангиеносцы мукора, как прайилб, простые, неветвящиеся, отрастают от грибницы одиночно. Спорангии, сидящие на ихверхушках (колумеллах), крупные шарообразные с массой спор, которые видны через тонкую прозрачную оболочку спорангия. Споры, называемые спораигиоспорами, одноклеточные, круглые, гладкие, бесцветные или сероватые.
В рабочей тетради зарисуйте гриб Mucor и дайте обозначение частей его мицелия.
Задание 2. Изучите морфологические признаки гриба Aspergillus
Порядок проведения работы. Для приготовления препарата гриба Aspergillus нужно взять воздушный окрашенный мицелий. Препарат готовится также, как и препарат гриба Mucor.
При микроскопировании найти многоклеточные гифы мицелия и органы размножения - конидиеносцы с конидиями. Конидиеносец по внешнему виду простой, одноклеточный, неветвящийся. На конце его имеется булавовидное вздутие, на котором расположены в один ярус вытянутые бутылочковидные клетки - стеригмы с отшнуровывающимися от них конидиями. Конидии располагаются по радиусам шара и напоминают струи воды, выливающейся из лейки, поэтому эти грибы иногда называют леечной плесенью. У разных видов плесени конидии окрашены различно.
Зарисуйте в тетради гриб Aspergillus и дайте обозначение частей его мицелия.
Задание 3. Изучите морфологические признаки гриба Endomyces lactis
Порядок проведения работы. Для приготовления препарата" Endomyces lactis снять препаровальной иглой, слегка соскабливая, его белый стелющийся бархатистый мицелий с субстрата (кисломолочных продуктов, квашеных овощей, прессованных дрожжей). При микроскопировании установите многоклеточность мицелия и отсутствие специальных органов размножения. Гриб размножается оидиями, которые образуются на концах гифа путем расчленения виде бесцветных клеток прямоугольной или округло прямоугольной формы. В препарате могут наблюдаться цепочка не распавшихся оидий. В рабочей тетради зарисуйте препарат и дайте обозначение каждой части мицелия.
Задание 4. Изучите морфологические признаки гриба Penicillium
Порядок проведения работы. Снять крышку с чашки Петри с колониями гриба Penicillium. Поставить чашку на предметный столик. Наблюдая сбоку, макрометрическим винтом опустите тубус с объективом 8х на расстояние 5-10 мм от чашки. Смотря в окуляр медленно опускайте тубус до появления контуров изобретения. Рассматривать следует окончания колоний. В рабочей тетради зарисуйте конидиеносец со стеригмами и конидиями.
Задание 5. Определите вид мииелиального гриба, выросшего на поверхности пищевого продукта
Порядок проведения работы. Для определения рода и вида мицелиальных грибов приготовьте препарат "раздавленная капля" из небольшого кусочка мицелия, взятого препаровальными иглами с поверхности пищевого продукта. Рассмотрите строение мицелия и найдите органы размножения. Для установления рода и вида исследуемого гриба следует использовать определитель (таблицы грибов), который имеется в лаборатории. Препарат зарисуйте и опишите.
Вопросы для самопроверки
1 Каковы особенности приготовления препарата мицелиальных грибов.
2 Морфологические особенности мицелиальных грибов: характеристика грибницы, особенности строения клетки мицелиальных грибов.
3 Способы размножения мицелиальных грибов.
Лабораторная работа №5
Определение общего количества микроорганизмов в молоке
Цель работы: Ознакомиться с методиками определения общего количества микроорганизмов в молоке свежем и пастеризованном. Определить антибиотики в молоке.
Задания
1.Ознакомиться с методами определения общего количества микроорганизмов в свежем пастеризованном молоке.
2. Определить свежесть молока пробой на редуктазу с метиленовым голубым и с резазурином.
3. Определить антибиотики в молоке.
Оборудование и реактивы
Проба молока (свежее и пастеризованное): 8 пробирок с 9мл. стерильной воды в каждой, стерильные чаши Петри, МПА в пробирках, раствор резазурина, сусло-агар, термофильный стрептококк.
Методические указания
Молоко, представляющее собой один из наиболее полноценных продуктов питания, в то же время является хорошей питательной средой для развития и размножения микроорганизмов. Основными источниками попадания микробов в молоко являются вымя и кожный покров животного, руки доильщика, посуда, воздух и др.
В процессе хранения молока микроорганизмы изменяют его свойства. Для более длительного сохранения первоначальных свойств молока необходимо снижать до минимума возможности попадания в него микроорганизмов в процессе хранения и транспортирования.
При исследовании необходимо обращать внимание на количественный состав микрофлоры молока. Это дает возможность правильно вести борьбу с возбудителями порчи молока.
В молоко при нарушении санитарных требований могут попасть бактерии
кишечной группы, маслянокислые, гнилостные (аэробы, анаэробы), дрожжи и
плесневые грибы, которые вызывают различные пороки молока и молочных
продуктов.
Отбор проб молока
Для бактериологического исследования молоко отбирают в стерильную колбу после тщательного перемешивания в количестве 50мл. Измеряют температуру продукта и охлаждают до 6°С.