Методические рекомендации по выполнению оценки качества среды по состоянию живых существ (стр. 3 из 6)

Подготовка и хранение материала. Материал до обработки хранят в замороженном виде. При отсутствии такой возможности для фиксации можно использовать 70% этанол или 4% формалин. Для изучения асимметрии у мелких млекопитающих используют черепной материал. Головы отделяют от тушек и вываривают в воде. Время вываривания зависит от способа и времени консервирования, а также возраста и вида животного (для мышевидных грызунов порядка 50 минут) и в каждом конкретном случае определяется опытным путем. Далее удаляют мягкие ткани с костей черепа при помощи глазного пинцета, препаровальных игол, зубной щетки с жесткой щетиной и глазного скальпеля. Качество очистки черепа контролируют под бинокуляром. Костный материал не требует особых условий хранения. Он может сохраняться длительное время. Материал должен быть снабжен этикеткой с указанием места и времени сбора материала и при необходимости другой информацией.

8. Выполнение исследований

8.1. Растения

При выполнении исследований выполняют следующие операции. Для измерения лист березы помещают пред собой брюшной (внутренней) стороной вверх. Брюшной стороной листа называют сторону листа, обращенную к верхушке побега. С каждого листа снимают показатели по пяти промерам с левой и правой сторон листа (рис. 1).

Рисунок 1. Схема морфологических признаков, использованных для оценки стабильности развития березы повислой (Betula pendula)

1- ширина левой и правой половинок листа. Для измерения лист складывают пополам, совмещая верхушку с основанием листовой пластинки. Потом разгибают лист и по образовавшейся складке измеряется расстояние от границы центральной жилки до края листа.

2 - длина жилки второго порядка, второй от основания листа.

3 - расстояние между основаниями первой и второй жилок второго порядка.

4 - расстояние между концами этих же жилок.

5 - угол между главной жилкой и второй от основания листа жилкой второго порядка.

Для исследований требуются циркуль-измеритель, линейка и транспортир. Промеры 1 - 4 снимаются циркулем-измерителем, угол между жилками (признак 5) измеряется транспортиром. Для этого центр основания окошка транспортира совмещают с точкой ответвления второй жилки второго порядка от центральной жилки. Эта точка соответствует вершине угла. Кромку основания транспортира надо совместить с лучом, идущим из вершины угла и проходящим через точку ответвления третьей жилки второго порядка. Второй луч, образующий измеряемый угол, получают, используя линейку. Этот луч идет из вершины угла и проходит по касательной к внутренней стороне второй жилки второго порядка. Результаты исследований заносятся в таблицу (образец таблицы см. в разделе 9. Обработка результатов исследований.).

8.2. Рыбы

Для оценки уровня стабильности развития при ихтиологических исследованиях используется 6-8 легко учитываемых признаков, таких как число лучей парных плавников, число тычинок на первой жаберной дуге (дополнительно можно учитывать тычинки и на остальных жаберных дугах), число чешуй в боковой линии и др. На рис. 2 приведена система морфологических признаков, используемая для оценки стабильности развития леща и плотвы.

Рисунок 2. Схема морфологических признаков леща (Abramis brama) и плотвы (Rutilus rutilus)* для оценки стабильности развития.

1-7 - меристические признаки:

1 - число лучей в грудных плавниках;

2 - число лучей в брюшных плавниках;

3 - число лучей в межжаберной перегородке;

4 - число жаберных тычинок на 1-й жаберной дуге;

5 - число глоточных зубов;

6 - число чешуй в боковой линии;

7 - число чешуй боковой линии, прободенных сенсорными канальцами.

* У плотвы не учитывается признак 5 в связи с направленностью асимметрии этого признака.

У ряда видов (например, у щуки) учитывают количество хемипор на разных участках головы, а у окуня, кроме того, учитывают число шипов (выростов) на преджаберной крышке. Перечни морфологических признаков, используемых для оценки стабильности развития у золотого и серебряного карася, щуки, окуня, бычка-зеленчака, приведены в Приложении 1. Для учета всех признаков необходим бинокуляр.

8.3. Земноводные

Для анализа используют две группы признаков – меристические признаки окраски и остеологии (рис. 3). При работе с группой европейских зеленых лягушек - озерной лягушкой (Rana ridibunda), прудовой лягушкой (Rana lessonae), гибридной формой (Rana esculenta) используются такие признаки как число полос и пятен на бедре, голени и стопе, число пятен на спине, число белых пятен на плантарной стороне второго, третьего и четвертого пальцев задней конечности, число пор на плантарной стороне четвертого пальца задней конечности, число зубов на межчелюстной кости и сошнике.

При проведении анализа следует учитывать ряд трудностей:

· Не учитывается мелкий крап.

· При работе с признаками 1-6, бывает трудно отличить пятно от полосы. Полосой следует считать тот элемент рисунка, длина которого по крайней мере в два раза превышает ширину.

· Пятна спины, расположенные между центральной линией и дорзолатеральной железой следует учитывать от основания головы до подвздошной кости, так как дальше часто располагается множество мелких пятен, точный учет которых затруднителен.

· Следует учитывать только наиболее крупные поры на плантарной поверхности четвертого пальца. Число таких пор обычно бывает не больше пятнадцати.

· Место соединения межчелюстной кости и верхнечелюстной кости определить достаточно легко, так как соединение это подвижно.

· При подсчете числа зубов следует помнить, что у амфибий происходит смена зубов в связи с чем, одного или нескольких зубов может не хватать, однако, это довольно легко определить по большому расстоянию между зубами. Такой пропуск в зубном ряду следует учитывать как зуб.

Для учета признаков 8-13 необходим бинокуляр. Схема морфологических признаков для травяной лягушки (Rana temporaria) приведена в Приложении 2.

Примечание.

Используя предлагаемый метод возможно проведение прижизненной оценки. При этом следует исключить признаки остеологии (признаки 12, 13) и признак 11 (рис. 3). Для получения достоверных результатов с помощью такой системы признаков минимальный размер анализируемой выборки следует увеличить до 30 особей.

Рисунок 3. Схема признаков европейских зеленых лягушек (Rana esculenta complex): озерная лягушка - R. ridibunda Pallas; прудовая лягушка – R. Lessonae Camerano; гибридная форма - R. esculenta L. для оценки стабильности развития.

1-13 – меристические признаки:

1 - число полос на дорзальной стороне бедра;

2 - число пятен на дорзальной стороне бедра;

3 - число полос на дорзальной стороне голени;

4 - число пятен на дорзальной стороне голени;

5 - число полос на стопе;

6 - число пятен на стопе;

7 - число пятен на спине;

8 - число белых пятен на плантарной стороне второго пальца задней конечности;

9 - число белых пятен на плантарной стороне третьего пальца задней конечности;

10 - число белых пятен на плантарной стороне четвертого пальца задней конечности;

11 - число пор на плантарной стороне четвертого пальца задней конечности;

12 - число зубов на межчелюстной кости;

13 - число зубов на сошнике.

8.4. Млекопитающие

При изучении стабильности развития млекопитающих используются краниологические признаки, а именно число мелких отверстий для нервов и кровеносных сосудов на левой и правой сторонах черепа. Для учета всех признаков млекопитающих необходим бинокуляр. На рис. 4 приведена схема признаков рыжей полевки (Clethrionomys glareolus) и обыкновенной полевки (Microtus arvalis). Схемы признаков других видов млекопитающих приведены в Приложении 3.

Рисунок 4. Cхема морфологических признаков для оценки стабильности развития для рыжей полевки (Clethrionomys glareolus и обыкновенной полевки (Microtus arvalis).

1-10 - число мелких отверстий:

1 - на верхнечелюстной кости (в районе диастемы), перед коренными зубами;

2 - на скуловом отростке верхнечелюстной кости;

3 - на основной затылочной кости (перед подъязычным отверстием);

4 - подъязычное отверстие (вместе с дополнительными);

5 - на предчелюстной кости (над инфраорбитальным каналом);

6 - на латеральной поверхности лобной кости (позади слезной);

7 - в нижней части орбитальной поверхности лобной кости (над орбитальной вырезкой);

8 - в верхней части мозговой пластинки лобной кости под теменным гребнем;

9 - на чешуйчатой кости;

10 - на сосцовой части каменистой кости.

9. Обработка и оформление результатов исследований

9.1. Растения

Для мерных признаков величина асимметрии у растений рассчитывается как различие в промерах слева и справа, отнесенное к сумме промеров на двух сторонах. Интегральным показателем стабильности развития для комплекса мерных признаков является средняя величина относительного различия между сторонами на признак. Этот показатель рассчитывается как среднее арифметическое суммы относительной величины асимметрии по всем признакам у каждой особи, отнесенное к числу используемых признаков. Такая схема обработки используется для растений. В таблицах 1-2 на примере березы приводится расчет средней относительной величины асимметрии на признак для 5 промеров листа у 10 растений.