Результаты наших исследований (1960, 1964) показали, что урогенитальные трихомонады размножаются на свежей, свободной от дополнительных примесей питательной среде ТУ (Ю. X. Терас, 1955) обычно путем продольного деления клетки на две особи (рис. 5, 6). Лишь иногда (при загрязнении пробирок) в первые 2—3 суток роста культуры встречаются отдельные паразиты, делящиеся на 4—8 особей. Трихомонады с множественным типом деления округлые, крупные (диаметр 18—40 мк), вяло подвижные (рис. 7, 8,
27
9). По своему характеру эти движения чаще не поступз тельные, а вращательно-качательные. Следует что даже в случае кажущейся абсолютной
У таких протистов обычно наблюдается более или мрнрр активная деятельность жгутиков. Имеются поэтому основа ния согласиться с мнением А. Ф. Аникина (1964?У что То вершенно неподвижных жизнеспособных трихомонад ^ бывает ни в выделениях из половых органов ни в культу рах. Разделение крупной трихомонады на дочернее особи может произойти одномоментно или последовательно Пои последовательном способе деления протиста протоплазмя материнской клетки распределяется между дочерними осо 1ми чаще неравномерно. Это обстоятельство позволили hp которым авторам (И Лазаревич, 1870; П В ЖурТскиГ 1956, Л. Г. Богачева, 1958, и др.) предположить и описать
в жизненном цикле урогенитальной трихомонады особый способ размножения, названный ими «почкованием».
Нам стало также известно, что появление в культурах значительного числа трихомонад с множественным типом деления происходит в случае воздействия на них некоторыми химическими и лекарственными веществами. Такая стимуляция множественного размножения протистов связана не с произвольным разведением того или другого вещества в питательной среде, а со строго определенными для каждого из них концентрациями, соответствующими сублетальным дозам в отношении этих паразитов (табл. 1). Активизируется множественное размножение протистов также в случае воздействия на них человеческой мочой, высокими
и низкими температурами.
Таблица 1
Уровень сублетальной концентрации некоторых веществ, обусловливающий множественное размножение урогенитальных
трихомонад
Название вещества
Концентрация вещества
в питательной среле
(в %)
рН питательной среды при наличии в ней сублетальной концентрации вещества
Винный спирт
Борная кислота
Хлорная известь
Осарсол
Формалин
Уротропин
Нашатырный спирт
Бензойная кислота
Едкий натр
Лизол
Соляная кислота
9,0—10,0
0,5—1,0
0,9—1,0
0,09—0,1
0,05—ОД
0,05—0,1
0,09—0,1
0,09—0,1
0,09—0,1
0,05—0,1
0,05—0,1
5,44
4,96
10,65
3,55
5,51—5,54 7,73—8,87
10,78 2,87
10,72
9,38—9,95 1,0
До настоящего времени природа фактора многоделения, как предполагаем мы его называть, стимулирующего множественное размножение трихомонад, остается пока не выясненной. Можно лишь предполагать, что своим происхождением он обязан массовой гибели паразитов, вызываемой многими агентами внешней среды, в том числе сублетальными дозами химических веществ. Возможно, что именно погибшие паразиты являются источником возникновения фактора многоделения. Зависимость же его происхождения от концентрации водородных ионов исключается, подтверждением чему являются довольно широкие пределы колебаний рН среды (от 1,0 до 10,7), при которых в культурах по-
30
являлись паразиты с множественным типом деления (см. табл. 1).
Мы считаем, что по своей биологической сущности процесс множественного размножения урогенитальных трихо-монад, очевидно, является одной из форм защиты и сохранения данного паразита как биологического вида от вредных воздействий окружающей среды. Убеждают нас в этом не только результаты собственных исследований, но и наблюдения В. И. Рыбникова (1964), согласно которым малоподвижные трихомонады появлялись также в естественной среде обитания (мочеполовые органы) в случае назначения больным радио-, рентгено- и химиотерапии, т. е. при воздействии на трихомонад явно неблаготворных факторов.
При многократном тщательном исследовании крупных трихомонад с множественным типом деления как в натив-ных мазках, так и на постоянных препаратах, окрашенных азур-эозином по Романовскому или гематоксилином по Гей-денгайну, нам никогда не приходилось наблюдать у них оболочки, хотя бы в какой-то мере напоминающей оболочку цисты амеб, лямблий или других простейших, имеющих в своем жизненном цикле эту стадию. Следовательно, результаты наших исследований согласуются с данными тех авторов (Б. А. Теохаров, 1959; Л. Е. Чалая, 1959; О. Иро-вец, 1948, 1958, 1960; Р. Петер, 1958, 1959, и др.), которые отрицают наличие стадии цисты в цикле развития урогени-тальной трихомонады. Возможно, что именно крупные трихомонады с множественным типом деления некоторые авторы принимали за цисты (В. Г. Поножина, 1923; С. Л. Козин, 1957, 1960, 1961, и др.), цистоидные формы (Г. М. Тка-ченко, 1955; или за так называемые устойчивые формы (Ю. X. Терас, 1954, 1959).
Такое допущение окажется тем более правомерным, если учесть, что крупные, круглые безжгутиковые, малоподвижные образования, т. е. формы паразитов, принимавшиеся этими авторами за стадию цисты или «цистоидную форму», обычно обнаруживаются, как было показано выше, у муж-чип. Более частые находки подобных образований в выделениях из мужской уретры, по нашему мнению, объясняются тем, что урогенителыше трихомонады в этом случае постоянно омываются мочой, а следовательно, систематически подвергаются воздействию фактора многоделения, стимулирующего множественное размножение трихомонад. Подобно этому протесты оказываются, как это следует из результатов наших наблюдений (см. табл. 1), под влиянием
31
фактора многоделения также в случае воздействия на них субтоксическими дозами осарсола. Поэтому мы считаем, что именно данный факт был положен в основу появившегося в литературе утверждения, согласно которому в цикле развития урогенитальных трихомонад якобы существуют так называемые устойчивые формы.
Итак, приведенные данные позволяют заключить, что урогенитальные трихомонады существуют лишь в вегетативной стадии. Основной биологической формой существования протеста является грушевидная, тогда как другие разновидности его форм являются промежуточной стадией развития, появляющейся только в процессе размножения. Промежуточную и далеко не постоянную стадию в жизненном цикле паразита представляют также крупные (до 40— 60 мк) и карликовые трихомонады. Те и другие появляются лишь в процессе размножения. Карликовые возникают вследствие неравномерного распределения протоплазмы между дочерними особями. Крупные трихомонады представляют собой паразитов, находящихся в стадии множественного деления, возникающего только в неблагоприятных условиях (при воздействии сублетальными дозами химических веществ, лучами радия, рентгеновыми лучами и т. д.). Трихомонады обладают подвижностью, питаются эндосмо-тически и путем фагоцитоза, во внешнюю среду они выделяют кислоту, газ и протеолитические ферменты (гиалуро-нидаза, амилаза и каталаза). В биохимическом отношении эти протесты являются активными микроорганизмами.
Не приходится сомневаться, что биологические свойства урогенитальных трихомонад, определяющие некоторые морфологические, физиологические и биохимические их особенности, должны учитываться прежде всего при решении вопросов, связанных с диагностикой трихомонадной инвазии. Становится также очевидным, что в связи с отсутствием в жизненном цикле урогенитальной трихомонады стадии цисты единственным возбудителем при данной инфекции может быть лишь вегетативная форма протиста. В этом свете ее устойчивость в условиях внешней среды приобретает особое значение.
УСТОЙЧИВОСТЬ ТРИХОМОНАД В УСЛОВИЯХ
ВНЕШНЕЙ СРЕДЫ
Исследованиями последних лет доказано, что обязательным условием жизнедеятельности урогенитальных трихомонад является наличие влаги. Различные факторы внеш-
32
ней среды, способствующие быстрому высыханию материала, содержащего трихомонады (повышение температуры, снижение влажности и т. д.), губительно действуют на паразитов. Например, в условиях 50% влажности трихомонады выживают в течение 12—20 часов (Е. Ин, 1956). Подобно большинству патогенных бактерий трихомонады хуже переносят высокие температуры. Так, если при комнатной температуре протесты оставались жизнеспособными в течение 10—60 минут (Б. А. Теохаров, 1958, 1959; Е. Ин, 1956; Preisler, 1960) и даже до 5 суток (И. А. Евнин, Н. А. Лапидус, 1939), то при более высоких температурах они погибают почти моментально. Напротив, к низким температурам трихомонады менее чувствительны. Оказалось, например, что при —10° они оставались жизнеспособными в течение 7 часов (Е. Ин, 1956). В случае замораживания протистов некоторые авторы (Lindgren, Ivey, 1964) сохраняли их при —43° в течение 8 недель, а при —79° — даже в течение 26 месяцев (McEntergart, 1959). В замороженной культуре тканей возможно хранение культуры трихомонад до 1 месяца. Количество выживающих в этом случае паразитов колеблется от 50 до 100%! (Christian, 1963). Через 1 год в таких условиях живыми оставался 1% паразитов. После оттаивания замороженного материала был отмечен . рост трихомонад, которые морфологически ничем не отличались от исходных, т. е. не подвергавшихся замораживанию при столь низкой температуре. В том же случае, когда протистов трижды подвергали замораживанию при —70° и оттаиванию при 37°, обычно наступало их полное разрушение (Mandel, Honigberg, 1964).
Прямые солнечные лучи убивают урогенитальных трихомонад через 45—60 минут (О. Ировец, 1960).