27. Федорова Л.С. Сравнительное изучение бактерицидной и спороцидной активности калиевой соли дихлоризоциануровой кислоты в чистом виде и в комплексе с хлористыми солями щелочных металлов//Современные методы и средства дезинфекции и стерилизации: Сб. научных трудов. М., 1978. N 27. С. 79 - 83.
28. Федорова Л.С. Бактерицидные и спороцидные свойства гипохлорита кальция нейтрального//Проблемы дезинфекции и стерилизации: Сб. научных трудов. М., 1976. N 25. С. 114 - 119.
29. Методы исследования дезинфекционных, дезинсекционных и тератизационных препаратов/Под ред. проф. В.И. Вашкова. М.: Медгиз, 1961. 236 с.
30. DRAFT EUROPEAN STANDARD. CEN/TC 216. NORME EUROPEENNE WI 216042, 8 September 2003. English version. Chemical desinfectants and antiseptics - Application of European standards for chemical desinfectants and antiseptics.
31. EUROPAISCHE NORM. EN 14347. Marz 2005. Deutsche Fassung. Chemische Desinfectionmittel und Antiseptika - Sporozide Wirkung (Basistest) - Prufverfahren und Anforderungen (Phase I).
Приложение 1
ХАРАКТЕРИСТИКА ТЕСТ-МИКРООРГАНИЗМОВ ПО МОРФОЛОГИЧЕСКИМ,
КУЛЬТУРАЛЬНЫМ, БИОХИМИЧЕСКИМ СВОЙСТВАМ,
ПРИСУШИМ ДАННОМУ ВИДУ
1) Bacillus cereus (шт. 96). Подвижная грамположительная палочка; размер, мкм: длина - 3 - 5, ширина - 1,2. Температура роста (°С): минимальная - 10 - 20; оптимальная - (37 +/- 1), максимальная - 35 - 45. Споры размером 0,8 х 1,2 мкм, эллиптической или цилиндрической формы, расположенные центрально. Аэроб. На МПБ (pH 7,3 +/- 0,1) через 24 ч инкубирования образует крошковидный осадок и пристеночное кольцо, образует R-формы; на МПА (pH 7,3 +/- 0,1) - круглые, сухие, белые, выпуклые колонии с неровным краем размером 3 - 5 мм; продукты расщепления глюкозы: кислота, ацетон, газ не образуется. Окрашиваемость вегетативных клеток по Граму, спор - по Цилю-Нильсону. По классификации патогенных для человека микроорганизмов относится к IV группе патогенности.
Bacillus cereus (шт. 96) используют для изучения и оценки спороцидной активности ДС, СС и их субстанций на основе кислородсодержащих и хлорсодержащих ДВ.
Тест-микроорганизм B. cereus (штамм 96) хранится в музее Федерального государственного учреждения науки "Научно-исследовательский институт дезинфектологии" Роспотребнадзора (117246, Москва, Научный проезд, д. 18).
2) Geobacillus stearothermophilus (шт. ВКМ В-718): подвижная грамположительная термофильная палочка. Оптимальная температура роста (55 +/- 1) °С, исключающая развитие других широко распространенных микроорганизмов. Споры эллиптические, расположенные центрально. Аэроб. На МПБ (pH 7,3 +/- 0,1) через 24 ч инкубирования образует помутнение среды, на МПА (pH 7,3 +/- 0,1) - слабо выпуклые колонии диаметром 2 - 4 мм с ровным краем. Реакция Фогес-Проскауэра отрицательная. Ферментирует глюкозу с образованием кислоты; не ферментирует арабинозу, ксилозу и маннин. Гидролизует казеин. Не расщепляет фенилаланин и тирозин. Непатогенен для человека и животных.
G. stearothermophilus используют для исследования и оценки действия водяного насыщенного пара под избыточным давлением при стерилизации ИМН.
Тест-микроорганизм G. stearothermophilus (штамм ВКМ В-718) хранится в музее культур:
- Федерального государственного учреждения науки "Научно-исследовательский институт дезинфектологии" Роспотребнадзора (117246, Москва, Научный проезд, д. 18);
- Испытательного лабораторного центра (ГУП) "Московский городской центр дезинфекции" (129337, г. Москва, Ярославское шоссе, д. 9).
3) Bacillus licheniformis (шт. G ВКМ В-1711D): подвижная грамположительная палочка. Оптимальная температура роста (37 +/- 1) °С. Споры эллиптические, расположенные центрально. Факультативный анаэроб. На МПБ (pH 7,3 +/- 0,1) через 24 ч инкубирования образует помутнение среды, на поверхности - сухую пленку; на МПА (7,3 +/- 0,1) - слабо выпуклые сухие колонии вытянутой звездчатой формы с неровными краями диаметром 4 - 6 мм, врастающие в питательную среду. Реакция Фогес-Проскауэра положительная. Ферментирует глюкозу с образованием кислоты и газа. Редуцирует нитраты, образует газ в среде для нитрификации в анаэробных условиях. Утилизирует пропинат. Гидролизует крахмал. Расщепляет аргинин. Не образует индол, лецитиназу, кислоту в лакмусовом молоке. Непатогенен для человека и животных.
Bacillus licheniformis (шт. G ВКМ В-1711D) используют для исследования и оценки спороцидной активности сухого горячего воздуха при стерилизации ИМН.
Тест-микроорганизм В. licheniformis (шт. G ВКМ В-1711D) хранится в музее культур:
- Федерального государственного учреждения науки "Научно-исследовательский институт дезинфектологии" Роспотребнадзора (117246, Москва, Научный проезд, д. 18);
- Испытательного лабораторного центра (ГУП) "Московский городской центр дезинфекции" (129337, г. Москва, Ярославское шоссе, д. 9).
4) Bacillus subtilis (шт. 7): подвижная грамположительная палочка размером 2 - 3 х 0,7 - 0,8 мкм. Температура роста, °С: минимальная - 5 - 20, оптимальная - (37 +/- 1), максимальная - 45 - 55. Споры размером 0,8 х 1,2 мкм, эллиптической или цилиндрической формы, расположены центрально. Аэроб. На жидких питательных средах образует пленку серовато-белого цвета; на плотной питательной среде образует R-форму, складчатые колонии телесного цвета с изрезанными краями размером 3 х 5 мм, легко снимающиеся петлей. Разлагает глюкозу на кислоту, ацетон, газ не образует. Окрашиваемость вегетативных клеток по Граму, спор - по Цилю-Нильсону.
Bacillus subtilis (шт. 7) используют для изучения и оценки спороцидной активности ДС, СС и их субстанций на основе альдегидсодержащих ДВ. Тест-микроорганизм Bacillus subtilis (шт. 7) хранится в музее культур Федерального государственного учреждения науки "Научно-исследовательский институт дезинфектологии" Роспотребнадзора (117246, Москва, Научный проезд, д. 18).
+ -
5) Вакцинный штамм B. anthracis СТИ-1 (рХ01 , рХ01 ). Штамм СТИ-1 - это
подвижная грамположительная палочка размером 3 - 5 х 1,0 - 1,2 мкм.
Температура роста, °С: минимальная - 15 - 20, оптимальная - 37 +/- 1,
максимальная - 40. Споры размером 0,8 х 1,2 мкм, эллиптической или
цилиндрической формы, расположены центрально. Анаэроб, на жидких
питательных средах растет в виде ватных хлопьев, взвешенных комков, не
вызывает помутнения; на плотной питательной среде образует R-формы,
серовато-белые с ворсистым краем ("львиная грива"), колонии размером 3 - 5
мм. Разлагает глюкозу на кислоту, ацетон, газ не образует; не разлагает
арабинозу, рамнозу, маннозу, галактозу, рафинозу, лактозу, гекулин, маннит,
дульцид, сорбит, инозит; не обладает гемолитической, фосфатазной,
лицитинозной активностью; лизируется специфическим сибиреязвенным фагом;
дает положительную реакцию с люминесцирующей адсорбированной сибиреязвенной
сывороткой, чувствительна к воздействию сибиреязвенного фага и пенициллина,
не вызывает гемолиза эритроцитов; при посеве на 5%-ный кровяной агар не
коагулирует яичный желток.
Используют при изучении и оценке спороцидной активности ДС и их
субстанций в виде сибиреязвенной живой вакцины СТИ-1 для людей, МТРУ-42 N
10, представляет собой живую споровую культуру сибиреязвенных вакцинных
штаммов. Используют при изучении спороцидной активности ДС и их субстанций.
+ + + +
6) Bacillus anthracis, шт. 81/1 (рХ01 , рХ02 ) или 27 (рХ01 , рХ02 ) -
это подвижные грамположительные палочки размером 3 - 5 х 1,0 - 1,2 мкм.
Температура роста, °С: минимальная - 15 - 20, оптимальная - 37 +/- 1,
максимальная - 40. Споры размером 0,8 х 1,2 мкм, эллиптической или
цилиндрической формы, расположены центрально. Анаэроб, на жидкой
питательной среде растет в виде ватных хлопьев, взвешенных комков, не
вызывает помутнения; на плотной питательной среде образует R-формы,
серовато-белые с ворсистым краем ("львиная грива"), колонии размером 3 - 5
мм. Разлагает глюкозу на кислоту, ацетон, газ не образует; не разлагает
арабинозу, рамнозу, маннозу, галактозу, рафенозу, лактозу, гекулин, маннит,
дульцид, сорбит, инозит; не обладает гемолитической, фосфатазной,
лицитинозной активностью; лизируется специфическим сибиреязвенным фагом;
дает положительную реакцию с люминесцирующей адсорбированной сибиреязвенной
сывороткой.
Используют при изучении спороцидной эффективности ДС при обеззараживании различных объектов с применением биологического метода контроля.
Приложение 2
МЕТОДИКА
ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ
ТЕСТ-МИКРООРГАНИЗМОВ, ПРЕДНАЗНАЧЕННЫХ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ И ОЦЕНКИ
СПОРОЦИДНОЙ АКТИВНОСТИ ДС, СС И ИХ СУБСТАНЦИЙ
1. Агар Хоттингера
Мясной перевар по Хоттингеру (аминный азот от 140 до 160 мг %) 1000 мл
Натрий хлористый 5,0 г
Агар 20,0 г
pH 7,3 +/- 0,1
Мясной перевар по Хоттингеру разводят дистиллированной водой до содержания аминного азота от 140 до 160 мг %, добавляют хлористый натрий и агар, кипятят на слабом огне при постоянном помешивании до полного расплавления агара. Фильтруют и стерилизуют при температуре 120 °С в течение 30 мин.
2. Пшеничный агар
Пшеничная крупа "Артек" (или "Полтавская") 500,0 г
Агар 25,0 г
Дистиллированная вода 1000 мл
pH 7,3 +/- 0,1
Пшеничную крупу "Артек" (или "Полтавская") заливают дистиллированной водой. Через 18 - 24 ч настой аккуратно сливают, не выжимая, доводят до первоначального объема, добавляют агар и растапливают на водяной бане или в автоклаве (текучим паром 1 ч). Оставляют в теплом месте до осаждения осадка на 12 ч. Остывший агар выкладывают на противень и срезают осадок. Агар растапливают на водяной бане, постоянно помешивая. Устанавливают pH 7,3 +/- 0,1. Разливают в бутылки, пробирки, матрацы (в зависимости от решаемых задач и целей). Стерилизуют текучим паром в аппарате Коха по 1 ч в течение 3 сут.
3. Картофельно-пептонный агар
Пептон 5,0 г
Мел 1,0 г
Агар 25,0 г
Картофельная вода 1000 мл
pH 7,1 +/- 0,1
Сырой картофель (из расчета 200 г очищенного картофеля на 1 л водопроводной воды) тщательно моют, очищают от кожуры и глазков, нарезают мелкими ломтиками, заливают водопроводной водой и кипятят 30 мин. после закипания (молодой картофель употреблять нельзя). Отвар отстаивают и фильтруют в холодном состоянии через ватно-марлевый фильтр. Доводят объем фильтрата до первоначального. Устанавливают pH 7,1 +/- 0,1. Добавляют пептон и агар. Нагревают, помешивая, до полного расплавления агара, фильтруют через ватно-марлевый фильтр, после чего добавляют мел. Разливают по флаконам, стерилизуют при 120 °С в течение 30 мин. После стерилизации среду во флаконах скашивают.