3. Характеристика типа высшей нервной деятельности по анамнестической схеме И.П.Павлова;
4. Метод определения функционального состояния гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной системы;
4.1. Определение концентрации кортизола в слюне;
4.2. Методы определения функционального состояния гипоталамо-гипофизарно-гонадной системы;
4.3. Определение уровня эстрадиола и тестостерона в слюне.
2.2.1. Патохарактерологический диагностический опросник
Для диагностики акцентуаций использовался опросник ПДО (Патохарактерологический диагностический опросник), разработанный А.Е.Личко. Лежащая в его основе психологическая теория отношений определила процедуру и своеобразное построение опросника. Исследованию подвергается отношение исследуемого к ряду личностных проблем, разбитых в тексте опросника на 25 тем. Каждая тема содержит список от 10-ти до 19-ти возможных ответов. Испытуемому предлагается выбрать наиболее подходящие варианты, причем допускается выбор наиболее подходящих вариантов, а также отказ от выбора. Такая процедура, несомненно, представляет больше возможностей для проявления истинной установки испытуемого по сравнению с неизбежно вынужденными ответами в традиционных опросниках.
Основная задача опросника ПДО – определение типов акцентуаций характеров и типов психопатии. Помимо этого опросник позволяет определять психологическую склонность к алкоголизму, делинквентности, оценивать риск формирования психопатии, развития депрессий и социальной дезадаптации, оценивать возможность органической природы психопатии и акцентуации характера, оценивать степень проявления реакции эмансипации в самооценке, а также степень проявления черт мужественности-женственности в системе отношений.
Так опросник представляет собой список утверждений, сгруппированных по 25-ти темам, предваряемый общей инструкцией к первому исследованию. Ответный бланк содержит номера, сопровождающие номер утверждений в тексте опросника. Тестирование проводится индивидуально или с группой, включает два исследования и требует на каждое исследование от 30 минут до 1часа времени. Опросник рассчитан на подростков в возрасте от 14 до 18 лет, хотя возможно обследование более раннего возраста – 11-12 лет. Принципиальных ограничений нет, хотя достоверность результатов все же снижается. Опросник не пригоден для подростков с выраженной интеллектуальной недостаточностью, либо с присутствием острого психопатического состояния с нарушениями сознания, а также при выраженном психическом дефекте.
В первом исследовании испытуемый знакомиться с инструкцией в тексте опросника и затем в каждом разделе выбирает наиболее подходящий ответ ил несколько ответов.
Во втором исследовании он инструктируется устно и затем в тех же самых разделах выбирает один или несколько наиболее неподходящих ответов.
В обоих исследованиях нельзя выбирать более трех ответов и разрешается отказаться от выбора в каких-то разделах.
Первичная обработка результатов осуществляется с помощью ключей с кодом шкалы объективной оценки, диагностика типов акцентуаций характера производится с помощью последовательно применяемых правил, сформулированных А.Е.Личко.
Число обследованных в ходе разработки EPI превышает 30 000 человек. Испытуемые были разделены на группы в зависимости от проявлений диагностируемых характеристик. Изучались ответы лиц, отнесенных компетентными экспертами в группы экстравертов или интровертов, нейротиков или эмоционально уравновешенных. На основе полученных данных определялась дискриминативная возможность каждого вопроса. В ходе разработки ЕРI было установлено, что экстраверсия является фактором высшего порядка, и, следовательно, в вопросах должны быть в более или менее равной доле представлены факторы низшего порядка. Прежде всего, речь идет о таких выделенных Г. Айзенком компонентах экстраверсии, как «импульсивность» и «общительность».
Коэффициенты ретестовой надежности EPI для фактора экстра—интроверсии составляют 0,82-0,85, для фактора нейротизма — 0,81—0,84, коэффициент надежности методом расщепления — 0,74-0,91. В зарубежных исследованиях сообщается о достаточной валидности EPI, иногда эти данные оспариваются. В данном опроснике существенно изменилось значение коэффициента интеркорреляции между шкалами (от +0,12 до —0,16), что соответствовало теоретическим предположениям Г. Айзенка. Предложен сокращенный вариант ЕРI, состоящий из 12 вопросов. Показатели корреляции с полным вариантом по шкале экстра-интроверсии —0,81, нейротизма — 0,79. Созданы варианты EРI для обследования детей и подростков.
На основе дальнейших исследований И.П.Павлова и сотрудников, направленных на анализ типов ВНД по показателям силы нервных процессов, их уравновешенности и подвижности как базисных личностных измерений, была предложена тестовая методика, получившая название «Характеристика типа высшей нервной деятельности по анамнестической схеме». Методика состоит из 42 вопросов, предназначенных для диагностики показателей силы нервной системы, показателей уравновешенности нервных процессов, показателей подвижности нервных процессов. Ответы выражаются в баллах и оцениваются по специальной шкале. Обработка результатов производится по каждому из разделов и на основе полученных данных производится заключение о выраженности силы, уравновешенности, подвижности нервных процессов.
2.2.4. Метод определения функционального состояния гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной системы
Как указывалось в обзоре литературы, в ГГАКС следует различать три основных звена: 1 – гипоталамическую регуляцию кортикотропной функции гипофиза, базирующуюся на продукции кортиколиберина нейросекреторными клетками; 2 – синтез и секрецию кортикотропина аденогипофизом; 3 – кортикостероидогенез в коре надпочечников под влиянием кортикотропина.
Изучение функций ведущих адаптационных систем ставит некоторый ряд методологических проблем, связанных с определением свободного кортизола. Важным научным инструментом в физиологии прошедшего десятилетия стала оценка уровня стероидных гормонов в слюне (Gubareva, 1996, 2001; Kirschbaum, Hellhammer, 1999).
2.2.4.1. Определение концентрации кортизола в слюне
Кортизол в слюне определяли методом твердофазного иммунохемилюминисцентного анализа.
Кортизол - стероидный гормон с молекулярным весом 362 Да. Количественное определение уровня кортизола в крови имеет диагностическое значение при оценке функционирования системы гипоталамус - гипофиз - кора надпочечников.
Принцип работы набора состоит в следующем. В лунках при добавлении исследуемого образца и конъюгата кортизол-пероксидаза во время инкубации устанавливается равновесие между конъюгатом и эндогенным кортизолом сыворотки крови за связывание с антителами, иммобилизованными на внутренней поверхности лунок. При удалении содержимого из лунок происходит разделение свободного и связанного антителами кортизола и коньюгата кортизол-пероксидаза причем количество связанного антителами конъюгата обратно пропорционально количеству кортизола в образце сыворотки крови.
Во время инкубации с сигнальным реагентом в лунках происходит испускание квантов света. Интенсивность свечения прямо пропорциональна количеству связанного антителами конъюгата кортизол-пероксидаза. После измерения интенсивности свечения раствора в лунках на основании калибровочной кривой рассчитывается концентрация кортизола в определяемых образцах.
2.2.4.2. Методы определения функционального состояния гипоталамо-гипофизарно-гонадной системы
О функциональной активности гипоталамо-гипофизарно-гонадной системы (ГГГС) допустимо судить по уровню периферических половых гормонов – эстрадиола (Э) и тестостерона (Т), поскольку концентрация последних зависит от секреции гонадотропина, продуцируемого аденогипофизом. Снижение или увеличение уровня циркулирующих в периферической крови Э и Т могут служить критерием целостности оси гипоталамус – гипофиз - кора надпочечных желез - половые железы (И.А.Држевецкая,1994). Для измерения эстрадиола и тестостерона в слюне использовали высокочувствительный конкурентный иммунологический метод.
2.2.4.3. Определение уровня эстрадиола и тестостерона в слюне
Для измерения уровня эстрадиола (Э) и тестостерона (Т) в слюне человека использовали высокочувствительный конкурентный иммунологический метод, основанный на конкуренции эстрадиола и тестостерона, содержащегося в образце, с эстрадиолом и тестостероном, меченным пероксидазой хрена (коньюгат), за ограниченное число связывающих центров – специфических антител: на эстрадиол – кроличьи антитела к ослиному глобулину и тестостерон – бараньи антитела к мышиным глобулинам. Влияние глобулина, связывающего половой гормон, нейтрализуется использованием соответствующего смещающего агента. Антитела присутствуют в жидкой фазе (реагент для анализа) и захватываются во время инкубации вторым антителом (ослиный Ig к кроличьим антителам и мышиный Ig к бараньим антителам), нанесенным на лунки. Количество коньюгата, севшего на лунку к концу инкубации, обратно пропорционально концентрации эстрадиола или тестостерона в образце. В конце инкубации не связавшийся коньюгат удаляется отсасыванием и промывкой лунок при помощи устройства для промывки Амерлайт. Пероксидазная активность связанного коньюгата измеряется по реакции усиленной люминесценции. Для инициирования реакции испускания света в лунки добавляется сигнальный реагент, содержащий люминогенные субстраты (производную люминола и соль перкислоты) и усилитель. Усилитель (замещенный фенол) увеличивает интенсивность света и продлевает его испускание. Световые сигналы считываются анализатором Амерлайт.