Таким образом, протективный механизм молозива является в значительной степени иммунологическим и ассоциируется с антителами против «К» антигенов Е. coli, вызывающих колибактериоз неонатальных телят.
Однако наиболее важным фактором, влияющим на выращивание новорожденных телят, является абсорбция колостральных антител в соответствующем физиологическом количестве. Молозиво здоровых коров — наиболее сильнодействующее лекарственное средство для телят. Оно обеспечивает большую защиту новорожденных, чем фармацевтика [V.C.R. Irvin, 1974]. Это было доказано в большинстве случаев, когда выживание телят в значительной степени зависело от адекватного поглощения молозива и абсорбции.
Летальность среди телят, лишенных молозива, достигала 70-90 % с наибольшим падежом от эшерихиоза или пастереллезной пневмонии. Несмотря на то, что новорожденные телята иммунокомпетентные при рождении, они не способны быстро анамнестически реагировать, то есть подвергать действию лимфоцитов определенным антигенным повторным воздействиям. Поэтому несколько дней необходимо телятам для установления иммунологической реактивности и продуцирования иммуноглобулинов. В этот лаг-период (промежуток времени между раздражением и ответной реакцией) телята остаются иммунологически незащищенными и восприимчивыми к патогенным микроорганизмам. Следовательно, здоровье телят зависит от поглощения и абсорбции колостральных иммуноглобулинов, обеспечивающих максимальную резистентность от инфекционных заболеваний в течение первой недели жизни [T.C. McGuire, D.S. Adams, 1982].
Известно, что телята способные абсорбировать иммуноглобулины наиболее эффективно в течение первых 8 ч после рождения с незначительным снижением уровня в течение 24 ч. Это происходит в результате «закрытия» интестинального эпителия и прекращения активного транспортного механизма [G. H. Stott, D. B. Marx, B. E. Menefel and G. T. Nightengale, 1979]. Кроме того, иммуноглобулиновый уровень у коров снижается быстро после родов, в течение первых трех дней. Поэтому необходимость раннего поглощения молозива является неотъемлемым элементом системы выращивания телят.
Новорожденные телята очень лимитированы гликогеном (животный крахмал), который накапливается в печени. Он должен использоваться как адекватный источник энергии после рождения для поддержания позитивного энергетического уровня. Высокий уровень циркуляции в крови телят молозива перед рождением до некоторой степени обеспечивает глюконеогенез (образование глюкозы из протеина и жира) в первые 12 ч.
Молозиво превосходный источник энергии, протеина, витаминов А и D, комплекса витаминов В, а также кальция, фосфора, магния и хлоридов.
В наших исследованиях (учхоз «Кетросу» района Анений Ной, ОПХ «Колоница») 26,6 % (4/15) телят, лишенных молозива, выживали, в то время как ни один теленок, кормившийся молозивом не погиб. На фермах применялось стандартное лечение, включая заменитель молока с электролитным раствором 3 дня и более и последующие 2 дня реадаптации — заменитель молока, когда диарея была корректирована (нейтрализована). Антибиотики орально не применяли для того, чтобы не уничтожить нормальную бактериальную популяцию и не вызвать фунгальный (грибной) гастроэнтерит. Значительная перегрузка организма телят антибиотиками может содействовать повышению восприимчивости к фунгальной инфекции, не поддающейся лечению[М. А. Сидоров, 1981; У. Риихикоски, 1986].
Заболевание телят колибактериозом на 2-5 дни жизни вынуждает вакцинировать против эшерихиоза стельных коров для создания невосприимчивости у нарождающегося молодняка. Против колибактериоза вакцинируют животных во всех развитых странах. Первые вакцины колибактериоза телят начали применять в 40-х годах. Они представляли инактивированную микробную суспензию штаммов кишечной палочки, выделенных от больных или павших животных и использовались в хозяйствах различных регионов с незначительной эффективностью. Для профилактики колибактериоза в настоящее время применяют поливалентную гидрооксиалюминевую формол-тиомерсаловую вакцину против колибактериоза (эшерихиоза) поросят, телят и ягнят. Изготовляют два варианта:
Вакцина против колибактериоза поросят: О8:К43, О9:К30, О78:К80, О138:К81, О139:К82, О141:К85:К88, О147:К87:К88, О149:К91:К88.
Вакцина против колибактериоза телят и ягнят: О8:К43, О9:К30, О15:К14, :К30, О20, О26:К60, О41, О55, О78:К80, О86:К61, О115, О117:К62, О119:К69, О101:К99.
На фоне применения данной вакцины мы предусмотрели:
1. Установить серотиповую принадлежность эшерихий, выделенных от больных и павших телят.
2. Определить уровень антител, приобретенный телятами в результате вакцинации стельных коров в сыворотке молозива и сыворотке крови телят против выделенных серотипов кишечной палочки.
3. Разработать экспресс-метод для индикации «К» антител в колостральной сыворотке коров и сыворотке крови новорожденных телят.
Для выделения культур Е. coliотбирали патологический материал от павших телят, а от больных фецес, из хозяйств неблагополучных по колибактериозу, Культуры выделяли и идентифицировали в соответствии с «Методическими рекомендациями по бактериологической диагностике колибактериоза» (1981; 1991).
Принадлежность исследуемых культур Е. coliк О серогруппам устанавливали в РА с типоспецифическими О колисыворотками согласно наставлению по их применению.
Способность Е. coliобразовывать фимбриальные адгезины определяли в капельной РА с моноспецифическими антиадгезивными сыворотками К99, F41, Аtt25, 987Р, К88 ав, К88 ас, К88 аd.[О. А. Полякова, Н. И. Евглевская, Н. А. Соколова, 1986].
Вакцинацию стельных коров проводили «Поливалентной гидроокисиалюминиевой формол-тиомерсаловой вакциной против колибактериоза (эшерихиоза) телят и ягнят согласно наставлению по ее применению.
Пробы фецес разводили стерильным физиологическим раствором 1:100, затем пастеровской пипеткой засевали две капли взвеси кала, культивировали на 5 %-ном кровяном агаре, Мак Конки агаре, средах Эндо и Левина при 37°С 18 ч. Е. coliпересевали со сред Эндо и Левина на МПА и МПБ. Полученные агаровые и бульонные культуры выдерживали в темном месте при комнатной температуре для дальнейшего исследования и серотипизации.
Для бактериологического исследования отбирали следующий материал от падших телят: сычуг, верхний отрезок тощей кишки, нижний отрезок тощей кишки, части подвздошной, слепой кишки, мезентеральные лимфатические узлы, печень, селезенку и почки. Пробы отбирали также из других мест, таких как суставы, головной мозг, пуповина и легкие, если клинически и патологоанатомически выявляли аномалии в них. Пробы отбирали, избегая контаминации и культивировали на 5 %-ном кровяном агаре и Мак Конки агаре. Пробы подвздошной кишки и селезенки культивировали на среде Левина. Засеянные пробирки и чашки Петри инкубировали при обычной атмосфере (аэробные условия) при 37°С 18 ч. Три колонии из преобладающих типичных колоний Е. coliбыли пересеяны дополнительно на среды с углеводами (глюкоза, лактоза, сахароза, манит и др.). Пробирки инкубировали при 37° С 18 ч.
Критериями для установления диагноза на колибактериоз были: клиническое и патологоанатомические исследования, отличающиеся от других случаев диареи и гибели телят и которые ассоциировались со следующими бактериологическими данными:
a) большое количество Е. coliв верхнем отрезке кишечника и региональных лимфатических узлах, а также в других интестинальных органах;
b) отсутствие других патогенных бактерий, поражающих телят.
2.2.11.1. Определение «О» антигена.Выделенные культуры классифицировали серологически в порядке сравнения с серотипами, применяемыми при вакцинации. Культуру в начале тестировали пластинчатой реакцией агглютинации на предметном стекле, 18-часовую культуру из плотной питательной среды (МПА) смывали физиологическим раствором и полученную суспензию использовали как антиген. Эту суспензию нагревали при 100° С один час для инактивирования В и L типов «К» антигена и тестировали, смешивая одну каплю антигена с одной каплей соответствующей «О» сыворотки на зеркальном стекле, размещая его над водяной баней при 60° С. Результаты учитывали через 10 мин после смешивания. Позитивную реакцию подтверждали пробирочной агглютинацией, применяя формалинизированную шестичасовую культуру в МПБ.
2.2.11.2. Определение «К» антигена.Культуру вначале тестировали пластинчатой реакцией агглютинации на предметном стекле. Одну каплю живой суспензии культуры смешивали с одной каплей различных антисывороток. Результаты учитывали в течение 30 секунд после смешивания. Позитивную агглютинацию подтверждали пробирочной агглютинацией до титра тест сыворотки, применяя как антиген живую пятичасовую культуру в МПБ. Пробирки инкубировали при 37° С два часа, в последующем агглютинационные пробирки центрифугировали при 2000 об/мин в течение трех минут.