• молоко из правой и левой молочных желез исследуется отдельно, стерильные контейнеры для сбора молока заранее маркируются «П» и «Л»;
• первые 5—10 мл молока сцеживаются и выливаются, последующие 3—4 мл сцеживаются в стерильные контейнеры с завинчивающимися крышками;
• исследование должно быть начато в течение 3 часов (молоко хранят при 4°С).
Показания к проведению исследования. Серодиагностика - метод диагностики инфекционных заболеваний, основанный на выявлении антител к антигенам возбудителя заболевания в сыворотке крови больного. Он может быть использован как для текущей, так и для ретроспективной диагностики инфекционных заболеваний.
Взятие исследуемого материала: кровь для серологических исследований забирают у обследуемого натощак или не ранее, чем через 6 часов после еды, при условии, что он не ел яиц и жирной пищи. В противном случае сыворотка может быть мутной (хилезной), непригодной для исследования.
Для венепункции можно использовать два варианта пункционных систем:
1. одноразовые вакуумные системы (вакуэты, вакутейнеры), состоящие из держателя для одноразовой двусторонней иглы и пробирки с дозированным вакуумом;
2. одноразовые шприцы с подходящим диаметром иглы. Кровь обычно получают из локтевой вены в количестве 5—7 мл.
Ее собирают в сухую чистую пробирку. У детей, если венепункцию провести не удается, кровь для исследования можно взять из надреза на пятке.
Необходимое оснащение:
1.Фломастеры для маркировки проб.
2.Вакуумные системы.
ИЛИ
3.Одноразовые шприцы, иглы и пластиковые пробирки; штативы для пробирок.
4.Турникет (жгут).
5.Тампоны со спиртом, йодом или иным разрешенным антисептиком.
6.Стерильные марлевые тампоны.
7.Емкости с дезинфицирующим средством для сброса использованных игл.
8.Емкости с дезинфицирующими средствами.
9.Одноразовые перчатки.
10.Контейнеры для отходов.
Система состоит из стерильной одноразовой двусторонней иглы с двойной защитой, одноразового держателя и самой вакуумной пробирки. Используются пробирки с активатором свертывания или без него.
Порядок работы:
• снять защитный чехол с короткого плеча иглы и ввернуть иглу в держатель так, чтобы ее конец, закрытый резиновым колпачком, находился внутри держателя;
• наложить жгут и обработать зону венепункции антисептиком;
• взять держатель с иглой в правую руку, снять цветной защитный чехол с иглы и провести венепункцию;
• взять пробирку, вставить ее крышкой вперед в держатель и, надавив на дно пробирки, продвинуть ее внутри держателя до упора. Как только кровь начнет поступать в пробирку, следует ослабить жгут, левой рукой удерживая держатель с пробиркой;
• дождаться заполнения пробирки заданным объемом крови;
• если необходимо взять кровь в другую пробирку, иглу не вынимать из вены, вставить в держатель следующую пробирку и повторить необходимые манипуляции;
• взяв заданный объем крови, вынуть иглу из вены и обработать место пункции.
• наложить жгут и обработать зону венепункции антисептиком;
• распаковать шприц, снять с иглы защитный колпачок и провести венопункцию;
• медленно выдвигая поршень заполнить шприц кровью;
• закрыть иглу защитным колпачком и отсоединить ее от шприца;
• перелить кровь в пустую чистую пластиковую пробирку.
Если известно, что кровь невозможно доставить в лабораторию в течение суток, необходимо получить сыворотку. Для этого сыворотку крови, взятой в вакуумную или пластиковую пробирку для сыворотки, получают следующим образом:
• закрытую пробирку с кровью оставить при комнатной температуре на 15—20 минут;
• по прошествии этого времени пробирку центрифугировать при 1500 - 3000 оборотов;
• отделившуюся сыворотку аккуратно снять со сгустка стерильной пипеткой (например, пластиковой Пастеровской с закрытым резервуаром) и, соблюдая правила асептики, перенести в сухую стерильную пробирку с крышкой;
ИЛИ
• пробирку с кровью, закрытую пробкой, поместить в термостат с температурой 37°С на 30—60 минут;
• после свертывания крови образовавшийся сгусток отделить от стенок пробирки тонкой стеклянной палочкой или прокаленной и остуженной проволокой («обвести сгусток»);
• пробирку поместить на холод для ретракции сгустка;
• после завершения ретракции сыворотку снять со сгустка стерильной пипеткой (например, пластиковой Пастеровской с закрытым резервуаром) и, соблюдая правила асептики, перенести в сухую стерильную пробирку с крышкой; в противном случае она может быть оставлена над сгустком не более чем на 48 часов;
• правильно приготовленная сыворотка должна быть прозрачной, желтого цвета, без следов гемолиза.
Показания к проведению исследования: диагностика сифилиса.
Необходимое оснащение:
1.Капилляр Панченкова.
2.5% раствор натрия лимоннокислого.
Взятие исследуемого материала:
• с помощью капилляра Панченкова в пробирку внести 5% раствор натрия лимоннокислого, набрав его до метки «50»;
• этим же капилляром набрать кровь до метки «0»;
• внести кровь в пробирку с натрия цитратом и перемешать;
• отделить плазму от форменных элементов крови центрифугированием (15 минут при 1000—2000 об/мин) или отстаиванием.
В состав транспортной системы со средой входят: круглодонная пробирка из ударопрочного ПП, содержащая транспортную среду; пробирка оклеена этикеткой, на которой указаны: наименование среды, номер лота, срок годности и/или дата стерилизации; на этикетке имеются места для внесения информации о пациенте; полиэтиленовая защитная пробка, плотно закрывающая пробирку со средой и скрепленная с ней краем этикетки; зонд-тампон, вмонтированный в пробку, идентичную той, что закрывает пробирку со средой; пробирка со средой, закрытая пробкой, и палочка-тампон, вмонтированная во вторую пробку, упакованы вместе в бумагу-полиэтилен и стерилизованы гамма-излучением: на упаковке нанесены номер серии, срок годности и инструкция по использованию.
Срок годности: 4 года.
В последние годы клиническая микробиология как составная часть клинической лабораторной диагностики является наиболее динамично развивающейся областью медицины. Однако качество лабораторного анализа определяется, прежде всего, выполнением требований правильного сбора биологического материала для микробиологических исследований, его сохранности на преаналитическом этапе.
Врач-клиницист является основным заказчиком лабораторных анализов, а, следовательно, и пользователем их результатов. Он инициирует запрос на лабораторные исследования, составляя заявку на желаемые анализы в истории болезни.
При составлении заявки на исследования врач-клиницист должен учитывать:
1) цель назначаемых лабораторных тестов, как правило, это:
· уточнение диагноза, предположительно поставленного на основании других данных;
· оценка течения заболевания в динамике;
· скрининговые исследования;
2) соответствие заявки на лабораторные исследования «Стандартам лабораторных исследований» при данной нозологической форме или разработанной для данной нозологической формы программы лабораторных исследований;
3) соответствие времени назначения исследований динамике патологического процесса;
4) влияние лекарственных препаратов и диагностических процедур на уровень исследуемого показателя;
5) диагностическую чувствительность и специфичность теста.
Основные выводы:
1) Взятие материала предпочтительнее проводить до начала антибактериальной терапии. На фоне антибактериальной терапии материал забирают перед очередным приемом (введением) антимикробных препаратов, то есть в момент, когда их концентрация в организме минимальна;
2) при взятии проб следует строго соблюдать правила асептики, во избежание ее случайной посторонней контаминации;
3) для взятия проб следует использовать стерильные инструменты, а для их транспортировки стерильные пробирки или контейнеры. Использование нестерильных сухих, чистых пробирок допускается только для отбора и транспортировки крови на серологические исследования.
4) количество материала должно быть достаточным для проведения исследования;
5) транспортировка материала должна осуществляться в максимально короткие сроки: как правило, не более 1.5-2 часов;
6) все образцы должны иметь четкую маркировку, обеспечивающую их безошибочную идентификацию. К каждому образцу прикладывается направление, в котором указывается наименование лечебного учреждения, ФИО врача направившего материал, дата и время получения материала и другая информация необходимая для получения адекватного результата и его правильной интерпретации.
1. МУ 4.2.2039-05 «Техника сбора и транспортирования биоматериалов в микробиологические лаборатории»;
2. МУ ГУЗМО РФ от 28.10.97 «Правила и техника получения проб клинического материала для исследования в лаборатории клинической микробиологии»;
3. «Методические рекомендации по взятию, транспортировке, хранению и пробоподготовке биологического материала для ПЦР-диагностики», ЦНИИЭ МЗ РФ, 2003.