хорошо перемешивают. Если необходимо, то устанавливают рН перед
стерилизацией так, чтобы после автоклавирования рН составил (6,5
+/- 0,2) при 25 -С.
Полученную среду разливают по 100 куб. см в бутылочки.
Стерилизуют при (121 +/- 1) -С в течение 15 мин. Питательную среду
хранят в темном месте в течение одного месяца при (0 - 5) -С.
Перед использованием среду расплавляют и выдерживают в кипящей
водяной бане в течение 20 мин. для регенерации среды. Затем среду
охлаждают до (48 +/- 1) -С и вносят в каждую бутылочку 1 куб. см
раствора селективного агента (7.19.3.2.1.2) и 1 куб. см раствора
антиоксиданта (7.19.3.2.1.3). Смесь аккуратно перемешивают, чтобы
не было насыщения среды кислородом.
7.19.3.2.2. Питательная среда ГМК-1
Состав:
- кукурузно-молочная смесь - 30 г;
- пептон - 30 г;
- лактоза - 18 г;
- аскорбиновая кислота - 1 г;
- натрий лимоннокислый (трехзамещенный) - 12 г;
- магний сернокислый - 0,24 г;
- калий фосфорнокислый (однозамещенный) - 4 г;
- натрий фосфорнокислый (двузамещенный) - 2 г;
- агар - 6 г;
- дистиллированная вода - 2000 куб. см.
Приготовление:
50 г сухой питательной среды вносят в 1000 куб. см
дистиллированной воды, нагревают до полного растворения, при
наличии осадка фильтруют через ватный фильтр, устанавливают рН
(7,2 +/- 0,2) с помощью раствора аммиака с массовой долей 25% или
раствора гидроокиси натрия с массовой долей 40%. Среду разливают в
пробирки высоким столбиком по (10 +/- 0,5) или (20 +/- 0,5) куб.
см и стерилизуют при (121 +/- 1) -С в течение (10 +/- 2) мин.
Перед использованием пробирки со средой помещают в кипящую
водяную баню и выдерживают в течение 20 мин. для регенерации
среды. Затем охлаждают среду до (48 +/- 1) -С и в каждую пробирку
с 10 куб. см среды вносят 0,1 куб. см селективного агента
(7.19.3.2.1.2), и в пробирку с 20 куб. см среды вносят 0,2 куб. см
селективного агента (7.19.3.2.1.2). Содержимое пробирок осторожно
перемешивают.
7.19.4. Подготовка образцов и проб
Подготовку образцов и проб проводят в соответствии с 7.18.4.1;
7.18.4.3; 7.18.4.4 настоящего стандарта. Десятикратные разведения
продукта готовят от 1-го до 8-го. При приготовлении проб все
перемешивания проводят максимально осторожно, чтобы исключить
насыщение кислородом.
7.19.5. Посев и инкубация
7.19.5.1. Для определения количества бифидобактерий засевают
по 1 куб. см из четырех последних разведений в две чашки Петри
<*>.
--------------------------------
<*> Допускается проведение посева разведений продукта в
пробирки с высоким столбиком среды (7.19.3.2.2) с последующей
выдержкой в термостате при (37 +/- 1) -С в течение 5 сут.
7.19.5.2. В каждую чашку Петри заливают по 12 - 15 куб. см
регенерированной среды (7.19.3.2.1) температурой (45 +/- 1) -С.
7.19.5.3. Содержимое чашек Петри осторожно перемешивают и
оставляют для застывания.
7.19.5.4. После застывания чашки Петри переворачивают донышком
вверх и помещают в емкости (7.19.2.1), в которые вкладывают
анаэробный агент.
7.19.5.5. Термостатирование чашек Петри осуществляют при (37
+/- 1) -С в течение 5 сут. в анаэробных условиях.
7.19.5.6. Подсчет колоний
После инкубации подсчитывают количество колоний на чашках
Петри. Для подсчета используют чашки, на которых выросло от 10 до
300 колоний. Если колонии имеют гетерогенный вид, необходимо
сделать микроскопические препараты нескольких колоний для
подтверждения их принадлежности к Bifidobacterium.
7.19.5.7. Обработка результатов.
Количество бифидобактерий в пробе N, КОЕ/г, определяют по
формуле:
С
N = --------------, (2)
(n + 0,1n ) d
1 2
где:
С - сумма колоний, подсчитанных на чашках;
n - количество чашек, подсчитанных в самом низком разведении;
1
n - количество чашек, подсчитанных в самом высоком
2
разведении;
d - величина первого разведения, взятого для подсчета.
7.19.5.8. Пример для подсчета
-5
10 разведение - 295 и 245 колоний;
-6
10 разведение - 33 и 40 колоний, тогда:
С 295 + 245 + 33 + 40 613 5
N = -------------- = -------------------- = ---------- = 278 х 10 , КОЕ/г.
(n + 0,1n ) d -5 -5
1 2 (2 + 0,1 х 2) х 10 2,2 х 10
7.20. Определение массовой доли витаминов осуществляют по
методам, утвержденным Минздравом России.
7.21. Определение содержания микотоксинов, антибиотиков и
радионуклидов осуществляют по методам, утвержденным в
установленном порядке.
7.22. Определение пестицидов - по ГОСТ 23452 и методам,
утвержденным органами Госсанэпиднадзора Минздрава России.
7.23. Определение токсичных элементов:
- ртути - по ГОСТ 26927 и по [13];
- мышьяка - по ГОСТ 26930;
- меди - по ГОСТ 26931, ГОСТ 30178;
- свинца - по ГОСТ 26932, ГОСТ 30178;
- цинка - по ГОСТ 26934, ГОСТ 30178;
- кадмия - по ГОСТ 26933, ГОСТ 30178.
7.24. В нормативную (техническую) документацию допускается
включать прописи аттестованных методик выполнения измерений
показателей конкретного вида продукции, соответствующих ГОСТ Р
8.563 и внесенных в Государственный или Отраслевой реестры методик
выполнения измерений, метрологические характеристики которых не
хуже приведенных в данном стандарте.
8. Транспортирование и хранение
8.1. Йогурт транспортируют специализированным транспортом в
соответствии с правилами перевозок скоропортящихся грузов,
действующими на конкретных видах транспорта.
8.2. Срок годности йогурта (не более 30 сут.) устанавливает
(по согласованию с органами Госсанэпиднадзора Минздрава России) и
гарантирует изготовитель.
8.3. Условия хранения, транспортирования и реализации
устанавливает изготовитель по согласованию с органами
Госсанэпиднадзора Минздрава России в соответствии с технической и
технологической документацией на конкретное наименование йогурта.
Приложение А
(справочное)
БИБЛИОГРАФИЯ
[1] СанПиН 2.1.4.1078-2001 Гигиенические требования
безопасности и пищевой ценности
пищевых продуктов
[2] СанПиН 2.3.2.1074-2001 Питьевая вода. Гигиенические
требования к качеству воды
централизованных систем питьевого
водоснабжения. Контроль качества
[3] Инструкция по микробиологическому
контролю производства на
предприятиях молочной промышленности
(Госагропром СССР, 1988)
[4] Инструкция по порядку и
периодичности контроля за
содержанием микробиологических и
химических загрязнителей в молоке
и молочных продуктах на предприятиях
молочной промышленности (1996 г.)
[5] СП 1.2.006-93 "Санитарные правила по безопасности
работ с микроорганизмами", ч. 1
"Порядок выдачи разрешений на работу
с микроорганизмами 1 - 4 групп
патогенности и рекомбинантными
молекулами ДНК"
[6] ТУ 38-105-1038-88 Пробки резиновые для жиромеров
[7] ТУ 6-09-2540 Натрия гидроокись. Стандарт-титр
[8] ТУ 10-02-02-789-192-95 Среды питательные сухие для
определения бифидобактерий и
пропионовокислых бактерий
[9] МУ 4082-86 МЗ СССР Методические указания по
обнаружению, идентификации и
определению афлатоксинов в
продовольственном сырье и пищевых
продуктах с помощью тонкослойной и
высокоэффективной жидкостной
хроматографии
[10] МУ 3049-84 МЗ СССР Методические указания по определению
остаточных количеств антибиотиков в
продуктах животноводства
[11] МУ 2964-83 МЗ СССР Методические рекомендации по
определению химическим методом
остаточных количеств
диэтилстильбестрола в продуктах
животноводства
[12] Под ред. Клисенко Методические указания по определению
т. 1 - 2, М., 1993 микроколичеств пестицидов в
Сборник МЗ СССР 45 - 23, продуктах питания, кормах и внешней
1976 - 93 г. среде
[13] МУ 5170-90 МЗ СССР Методические указания по определению
ртути в продуктах питания методом
беспламенной атомно-абсорбционной
спектрофотометрии
[14] СанПиН 2.3.4.551-96 Производство молока и молочных
продуктов. Санитарные правила и
нормы
[15] ТУ 49 206-82 Молоко сгущенное обезжиренное
[16] ТУ 49 1178-85 Пахта-сырье
[17] ТУ 10.02.02.940-91 Пахта сухая
[18] ТУ 10-02-02-789-65-91 Закваски бактериальные, дрожжи и
тест-культуры
[19] ОСТ 10 170-85 Сахар жидкий. Технические условия
[20] ТУ 25-2024.019-88 Бутирометры. Технические условия