Значение перечисленных показателей жизнестойкости зависели от условий выращивания молоди осетровых (пруды, бассейны), а так же от плотности посадки молоди в прудах, ухудшаясь при высоких плотностях посадки (Камаликова, 1984).
Описанный подход имеет два существенных недостатка. Первым является их летальность для тестирования молоди: в тестах и на терморезистенстность, и на солеустойчивость к дефициту кислорода и голоданию главным выходным показателем является время гибели особей в исследуемой выборке. Во-вторых, в природных условиях молоди рыб никогда не приходится сталкиваться с подобными экстремальными факторами, поэтому устойчивость к этим воздействиям не может в должной мере отражать способность молоди выжить после выпуска с завода в реку. Как было указано выше, основными факторами, лимитирующими выживание молоди в реке, является истребление ее хищниками в связи с недостаточно развитыми оборонительным поведением, и слабая способность молоди противостоять течению, которая может быть чревата слишком быстрым сносом в море, тогда, как подготовка осморегуляторной системы молоди к жизни к жизни в морской воде происходит гораздо успешнее при постепенном повышении солености, что возможно при активном миграционном поведении молоди. Умение молоди своевременно чувствовать и избегать мест повышенной концентрации токсикантов также можно рассматривать как адаптивный поведенческий признак.
Установлено, что после выпуска в реку заводская молодь русского осетра и севрюги, выращенная в прудах с богатой кормовой базой, с трудом добывает себе корм в реке, в результате сильно снижается темп ее роста и выживаемость (Касимов, 1973).
Для заводской молоди осетровых рыб плавательная способность в гидродинамической лотке была существенно ниже по сравнению с дикой молодью тех же видов (Ходоревская, 1973; Сбикин, Лепская, 1982). Это указывает на затруднительность нормального миграционного поведения молоди искусственного воспроизводства в реке, в условиях значительного течения до завершения процессов адаптации осморегуляторной системы к жизни в соленой воде, что также может служить одной из причин повышенной гибели заводской молоди осетровых.
Не в лучшем положении находится, и развитие оборонительного поведения молоди осетровых, выращенной в искусственных сооружениях и не знакомых с хищником. Так, за сутки пребывания в бассейне с хищником было истреблено до 90-100% заводской молоди севрюги, выращенной бассейновым способом, 65-75% особей, выращенных комбинированным бассейново-прудовым способом, и всего лишь 10% дикой молоди (Касимов, 1980). Проведенные на молоди осетровых рыб исследования пищедобывательной и оборонительной условнорефлекторной деятельности показатели, что в раннем возрасте (12-20 суток) скорость выработки тех и других условных рефлексов у дикой и заводской молоди севрюги практически одинакова, тогда как в более старшем возрасте (35-50 и 50-70 суток) дикая молодь обучается лучше чем прудовая, у которой условные рефлексы вырабатываются быстрее, чем у выращенной бассейновым и комбинированным способом.
Исследования условнорефлекторной деятельности молоди осетровых рыб представляются перспективными и важными. Вместе с тем, методики, применявшиеся для этих целей другими авторами (Лобашев и др., 1961; Маршин, 1962; Касимов, 1980), имеют ряд существенных недостатков. Пищевые методики требуют многодневного привыкания рыб к экспериментальной камере и местам кормления. Обучение необходимо производить индивидуально, т.к. каждая рыба должна находится в экспериментальной камере постоянно. Таким образом, тестирование статистически репрезентативных выборок из разных партий подобным способом может растянуться на многие недели и даже месяцы.
Оборонительные методики, как правило, более просты и не требуют столь длительного привыкания. Вместе с тем во всех работах по изучению оборонительных условных рефлексов в качестве безусловного подкрепления использовали электрический ток. Однако для осетровых это может приводить к нарушению целого ряда функций организма и ЦНС, вызывать стрессорные реакции, что сказывается на результатах эксперимента и последующем состоянии тестируемых особей.
Кроме того, в литературе не обнаружено попыток оценить общую двигательную активность молоди осетровых и ее реактивного поведения молоди. На млекопитающих для решения подобных задач применяется так называемый «тест открытого поля». В задачу данной работы входило оценить модификацию этого теста применительно к молоди осетровых рыб с целью оценки их качества.
Описание в литературе методики определения плавательной способности молоди рыб (Ходоревская, 1973) имеют тот недостаток, что физическая выносливость всех тестируемых рыб определяли при постоянной скорости течения. При этом наиболее слабые особи сносятся настолько быстро, что трудно зафиксировать точное время сноса. Выходом из данной ситуации может служить методики, при которых скорость течения изменяется ступенчато.
Поведенческие реакции рыб на различные химические раздражители и токсические вещества, растворы определенной температуры и солености, как правило, исследуется в Y-образных установках, дающие возможность оценивать распределение рыб в отсеках с разными значениями исследуемых параметров (Павлов, Трошичева, 1988). Представлялось целесообразным ввести в комплекс методов оценки силы реакции молоди осетровых на запах пищевых объектов, ее отношения к солоноватой воде, степень чувствительности и избегания токсических веществ в низких, сублетальных концентрациях.
Для реализации поставленных задач по оценке качества молоди, выведенной на рыбоводных заводах была использована установка «Ихтиотест» (Витвицкая и др., 1993), которая позволяет реализовать весь комплекс эколого-физиологических методов тестирования, а также обеспечивает максимальную экспрессностью тестирования.
Работы проведены в 2005 году на Александровском осетровом рыбоводном заводе Севкаспрыбвода. Дикую для исследований молодь отлавливали под нижним бьефом плотины Волгоградской ГЭС с помощью трала. Затем ее транспортировали на завод в специально оборудованных аквариумах. Время транспортировки составляло 2 суток. Транспортный отход составил 20%. Адаптация к условиям эксперимента составляла не менее 48 часов.
При разработке критериев оценки качества заводской молоди осетровых результаты тестирования последней сравнивали с таковыми дикой молоди. В качестве экспериментальной установки использовали устройство «Ихтиотест -4») и методы оценки, предложенные Л.В. Витвицкой (1993).
Оценку отдельной партии рыб осуществляли по следующим тестам: открытое поле, условный рефлекс, гидродинамический тест, реакцию на зимические раздражители разной модальности. За выходные показатели принимали количество пересечений рыбой линий координатной сетки в единицу времени, число находящихся особей в том или ином рукаве установки, выдерживание скорости течения и др.
В период тестирования было реализовано опытов:
- с дикой молодью севрюги 156 опытов;
- с прудовой молодью севрюги 75 опытов;
- с лотковой молодью 75 опытов;
- c испытаниями биологически активного СКБ 225 опытов.
Всего 606 опытов.
Все результаты эксперимента обработаны статистически. Достоверность различий устанавливали с применением t-критерия Стьюдента.
Усредненные данные для «дикой» молоди севрюги, принятые в качестве «эталона» представлены в таблице 1.
Одновременно с установлением качества молоди проводили испытания влияния биологически активного вещества СКБ на выживаемость и развитие молоди севрюги. Все выборки рыб были оценены по полной программе эколого-физиологического тестирования.
Такими выборками являлись:
1) стандартная прудовая молодь севрюги одного из прудов Александровского осетрового рыбоводного завода в возрасте 45 дней весом, в среднем 2,32г. (табл. 1), что соответствует принятого возратно-весовому стандарту (Лукьяненко и др.,1984);
2) молодь севрюги, от момента выклева до 48-дневного возраста выращивавющаяся в сетчатых ячейках в лотках аппарата «Остер» при кормлении дафниями и хирономидами: «лотковая молодь»;
3) молодь севрюги, выращивавшая в тех же условиях в лотках аппарата «Осетр», однако на 1-е, 3-и, 6-е, 10-е, 15-е, 19-е, 24-е, 28-е, 33-и, 36-е и 40-е сутки после выклева (всего 11 раз) подвергавшаяся воздействию биологически активного вещества – сыворотки крови кур биостимулирующей (СКБ) в концентрации 0,4 мл/л.
Таблица 1
Размерно-весовые показатели молоди севрюги, выращенной в разных условиях, в сравнении с дикой молодью
| Показатель | Дикая молодь севрюги | Прудоваямолодь | Лотковая молодь | Обработанная СКБ | |||
| М+m | % | М+m | % | М+m | % | ||
| Объем выборки, шт | 120 | 50 | 50 | 50 | |||
| Возраст рыб, дней | неизвест | 45 | 48 | 48 | |||
| Вес молоди, г | 1, 56+0, 19 | 2, 32+0, 09 | 148, 7 | 1,10+0,08 | 70,5 | 1,29+0,10 | 82,7 |
| Длина молоди, см | 8,06+0,19 | 8,36+0,12 | 103,7 | 5,66+0,11 | 70,2 | 5,84+0,19 | 72,4 |
Обработку последней выборки указанным биологически активным веществом производили, помещая сетчатые лотки аппарата «Осетр», где постоянно содержалась личинка, а затем молодь, в аквариум с раствором СКБ вышеуказанной концентрации на 1 час.
Возрастные, весовые и размеренные характеристики исследованных групп молоди приведены в табл. 1(точный возраст исследованной «дикой» молоди севрюги не известен). Все заводские группы укладывались в оптимальный для выпуска возраст (40-50 дней для русского осетра), рекомендуемый В.И. Лукьяненок с соавт. (1984), однако весовому стандарту для этого вида (2-2,5 г) отвечала только прудовая молодь. Как «дикая» молодь, так и обе «лотковые» группы имели существенно меньший вес и, соответственно, длину. Таким образом, если ориентироваться только на возратно-весовой стандарт, наиболее «качественной» является прудовая заводская молодь, а обе партии, выращенные в лотках, резко не соответствуют стандарту.