'В результате возможных нарушений в синтезе различных форм PlHiK при включении гаметоцида в метаболизм клетки неизбежно возникают анормальности в синтезе белка. В нормально развивающейся спорогенной ткани и в микроспорах активный синтез белка приходится на раннюю мейотическую профазу, его активность несколько снижается в зиготене — пахитене и совсем незначительна в период формирования тетрад [101]. Тапетум как ткань проявляет очень высокую метаболическую активность в течение всего периода микроспо-рогенеза вплоть до полного автолиза, поэтому отводить тапе-туму только секреторную роль — значит ограничить его многообразные физиологические функции [108]. Отмечено, что пул ДНК тапетума недостаточен, чтобы служить источником для формирующихся микроспор [98]. Возможно, тапетум снабжает микроспоры растворимыми ДНК предшественниками,
14
как это было показано с экзогенно добавленным меченым ти-мидином, который быстро проникал в ткани тапетума и включался в ДНК микроспор [72]. Наиболее вероятно, что синтез РНК в тапетуме и микроспорах материнской клетки пыльцы независим. Однако это не исключает, что тапетум, особенно в ранний период формирования микроспор, частично поставляет предшественников РНК в спорогенную ткань [94]. В тапетуме имеется довольно большой рибосомальный пул, который, по-видимому, полностью деградирует вместе с ним или может поставлять предшественников РНК для последнего периода синтеза РНК в развивающихся спорах [101].
Роль тапетума в белковом синтезе может быть объяснена с точки зрения синтеза специфических энзимов, связаннь1х с мейозом или другими процессами в спорогенной ткани. Допустимо участие тапетума и в распределении белкового резерва. Высокая пропорция piPHK в его тканях свидетельствует о синтезе белков denovo, часть ,из которьгх откладывается как запасные в микроспорак [28, 137]. Обработка гаметоцидными препаратами вызывает репрессию синтетических процессов белка в результате вмешательства этих физиологически активных веществ во взаимосвязь процессов ДНК— РНК—белок [13, 19,29, 30, 104, 120]. Выяснение сущности процессов индукции мужской стерильности лежит в этой области. Эффект ГМК на ростовые процессы посредством действия ингибитора на обмен нуклеиновых кислот — экспериментально установленный факт [29]. Значительное влияние оказывает ГМК на рибосомальную фракцию РНК путем изменений в процессах биосинтеза ДНК [19]. Возможно, что специфичность действия ГМК проявляется на уровне репрессии синтеза биокаталитически активных белков именно той фракции, которая ответственна за синтез и распад ДНК. При воздействии ГМК наступает уменьшение фосфорелированных богатых лизином гистоновых фракций, количество которых в активноделящихся клетках при нормальных физиологических условиях значительно выше. Такое изменение в соотношении гистоновых фракций оказывает влияние на матричную активность ДНК, что приводит к нарушению мейотического цикла. Не исключено, что изменение соотношения форм гистонов под влиянием ГМК создает условия для атаки и расщепления ДНК'азой доступных участков ДНК, о чем свидетельствует возросшая активность этого энзима у растений, обработанных ГМК [19].
ГМК как гаметоцид не проявляет высокой селективности действия, так как параллельно оказывает влияние на мери-стематическую ткань, где стимулирует процессы распада и ингибирует синтетическую активность клеток [29]. Очевидно,
15
'этим объясняются негативные эффекты, наблюдаемые при опрыскивании растений растворами ГМК: задержка в росте и развитии, морфологические аномалии и т. д. [20, 125].
Изменения в деятельности центров, программирующих природу синтезируемых белков и регулирующих их синтез, при включении механизмов стерильности вызывают сложные сдвиги в ферментативных системах. Низкая активность различных энзиматшческих комплексов стерильных аналогов озимой пшеницы и угнетение активности окислительно-восстановительных процессов, лежащих в основе метаболизма, проявляются на ранних этапах формирования ,и развития микроспор [6, 128]. Дезорганизация в энзиматических системах вызывает дисбаланс в аминокислотном, углеводном и нуклеиновом пулах.
Хлорированные производные аляфатических карбоновых кислот, применяемые в качестве гаметощидов, вызывают накопление в тканях пыльников большого количества аминокислот (а-аланина, р-аланина, аспарагиновой, глутаминовой, се-рина и др.), одновременно резко снижается содержание про-лиаа [8, 26, 43].
При сравнительных исследованиях мужской стерильности у различных видов растений отмечены изменения в соотношении отдельных аминокислот в аминокислотном пуле. Количественный и качественный состав аминокислот обусловлены механизмами цитоплазматической регуляции и спецификой метаболизма растения. Так, в стерильных пыльниках сорго по сравнению с фертильными установлена анормальная акку^-муляция глицина и заниженное содержание аспарагиновой .кислоты, серина и аланина. М. W. Brooks, J. S. Brooks и -L. Chien [52] считают, что в данном случае специфическим признаком, обусловливающим мужскую стерильность, является блокирование глицина в синтезе пурина. У других линий сорго с ЦМС обнаружено повышенное содержание трео-нина по сравнению с фертильными растениями. Пыльники последних включали больше аланина, глутаминовой кислоты и тирозина [43]. Вероятно, от типа стерильности и этапа, на котором возникают нарушения в синтетических процессах .клетки, зависит накопление или ингибирование образования определенных аминокислот.
.Сравнительные исследования содержания аминокислот у различных растений с разными формами мужской стерильности (функциональной, цитоплазматической и ядерной) показали, что во всех случаях было высокое содержание аспа-рагина' и низкое — пролина по сравнению с фертильными растениями [26, 43, 46]. Последующие эксперименты подтвер-
16
дили, что пыльники стерильных аналогов линий, полученных на основе цитоплазмы Т. timopheevi, характеризовались
-высоким содержанием свободного аспарагина и низким — пролина. Среди связанных аминокислот сохраняется та же закономерность [118].
^ Индукция мужской стерильности при использовании химических соединений, обладающих гаметоцидной активностью
'-(RMiK, FW-450 4- гиббереллин), сопровождалась аналогичными изменениями в аминокислотном пуле растений кукурузы: накоплением больших количеств a-алани'на, аспарагиновой
•и глутаминовой кислот, серина у стерилизованных растений с одновременным резким блокированием синтеза пролина [26]. Часть аспарагиновой кислоты подвергалась дальнейшему аминированию, что приводило к образованию амида, содержание которого у стерилизованных растений в отдельных случаях достигало 2%, или приблизительно половины от общей суммы всех свободных аминокислот [8]. Отмеченный многими авторами дефицит пролина у растений с различным типом мужской стерильности предполагает торможение синтеза белка путем включения механизмов мужской стерильности на более ранних этапах белоксинтетической системы (при синтезе аминокислот), в результате чего тормозятся процессы аминирования.
Полноценное питание в течение микроспорогенеза и развития пыльцы обусловливает нормальное развитие генеративных клеток. Массовое накопление свободного пролина начиналось после завершения мейоза, а в фазе тетрад он был обнаружен в заметных количествах [8]. Эта аминокислота принимает участие в ряде общих реакций метаболизма: активирует дыхание растительных тканей, регулирует поглощение кислорода, является донором NHz-групп при синтезе некоторых аминокислот и стимулирует синтез хлорофилла [8]. Про-лин относят к числу характерных аминокислот щелочных ядерных белков-гистонов и протаминов, несущих генетическую функцию в поддержании определенной структуры ДНК [9]. Влияние этой аминокислоты на активность генома связано с критическими этапами в развитии, когда незначительные структурные перестройки могут иметь решающее значение. Исключительно высокое содержание пролина в тканях гаме-тофита обусловливает определенную физиологическую «нагрузку», которую он выполняет в процессах формирования пыльцы.
В пыльце диплоидных сортов содержание пролина в два раза выше, чем в пыльце триплоидных, имеющих пониженную трертильность [8]. Эти данные свидетельствуют, что пролин .занимает особое место среди других аминокислот при форми-2—10287 17
ровании пыльцы и, возможно, является определяющим метаболитом нормальных физиологических процессов.
Пролин пыльцы, по-видимому, вовлекается в самые ранние фундаментальные реакции гаметогенеза, и его дефицит в пыльниках может иметь прямое отношение к абортивности пыльцы. Содержание пролина начинает .снижаться на стадии мейоза и становится прогрессивным к периоду интерфазы микроспор, когда уже наблюдается дегенерация пыльцевого зерна. Дефицит пролина — это следствие некоторых дефектов в мейозе или в предшествующей стадии микроспорогене-за [118]. Параллельно накопление глутаминовой кислоты в стерильных пыльниках свидетельствует о торможении процессов превращения ее в пролин, предшественником которого она является. Относительно высокое содержание аспарагина в пыльниках растений с мужской стерильностью также обусловлено метаболическими отклонениями.
Индукция мужской стерильности вносит свои коррективы в биосинтетические процессы не только генеративных органов, но и всего растения. Общее содержание аминокислот в семенах и вегетативных органах стерильных растений пшеницы выше, чем фертильных, на 8%, что можно объяснить спецификой метаболической активности митохондрий стерильных растений [46, 63]. У нормально развивающихся растений накопление свободного пролина начинается после редукционного деления и осуществляется за счет притока пролина из вегетативных органов [8].